如何提取松杉纲植物样本的DNA

为了验证植物/真菌DNA试剂盒确实能提取这类样本的DNA，小新又选了3种松杉纲植物（湿地松、雪松、水杉）进行对比实验，下面就让我们看看结果如何。

实验目的

对比Simgen的两种植物DNA提取试剂盒对松杉纲植物DNA提取效果的差异。

 实验材料：

1. 湿地松、雪松、水杉、一次性手术刀、研钵

2. 植物DNA试剂盒（Simgen Cat.No.3201050）、植物/真菌DNA试剂盒（Simgen Cat.No.3200050）

3. 超微量电子天平（DENVER INSTRUMENT，TP-213）

4. 电子恒温不锈钢水浴锅（上海宜昌仪器纱筛厂）

5. 旋涡振荡器（越新仪器，XH-C）

6. 台式离心机（eppendorf Centrifuge 5415 D）

7. 超微量分光光度计（Simgen Cat.No.sim100）

8. 电泳仪（北京六一仪器厂，DYY-6C型）

实验方法：

操作步骤如下：

实验结果：

1、在超微量分光光度计上分别用各自试剂盒的Buffer TE调零，测量洗脱下来的DNA，结果如下：

2、在1%的琼脂糖凝胶上，加入5 μl洗脱的DNA进行电泳，结果如下：

讨论与分析：

1. 从浓度测量结果来看，可以明显看到两个试剂盒提取效果的差异。植物DNA试剂盒提取的DNA测得的浓度都极低，植物/真菌DNA试剂盒提取的DNA测得的浓度则远高于植物DNA试剂盒提取的DNA。结合图一、图二的电泳结果可以进一步证明植物DNA试剂盒几乎没有提取到肉眼可见的DNA条带，而植物/真菌DNA试剂盒则成功提取到了DNA。

2. 从图一、图二的电泳图中可以看到植物/真菌DNA试剂盒提取的DNA中有明显的RNA残留，这也与测得的A260/A280比值相符合。一般新鲜样本提取的DNA残留有RNA是正常情况，并不影响后续实验。若是想要彻底去除RNA ，可在水浴环节加入5 μl RNase A储存液（50 mg/ml，Simgen Cat. No. 8001001）即可。

3. 从松杉纲植物叶片提取到的DNA浓度都不高，可能是该类植物叶片中含有的纤维素比较高所导致。还好植物/真菌DNA试剂盒一次可以提取500 mg植物样本中的DNA，后续可以用提高样本用量的方法来弥补。

4. 对于水杉、湿地松、雪松3种植物来说，使用植物DNA试剂盒提取的效果都不明显，无法提到DNA，而使用植物/真菌DNA试剂盒后提取效果明显，验证了植物/真菌DNA试剂盒确实能提取松杉纲植物样本的DNA。

植物DNA试剂盒操作步骤简单，但面对有丰富衍生物的特殊植物样本也有力不从心的时候。植物/真菌DNA试剂盒虽然操作步骤略微复杂，但对于有各种复杂衍生物的植物、真菌样本却都能应付，欢迎大家索要试用装尝试一下吧。