在生命科学领域中，不管是生物医药还是基础科研，研究人员长期以来使用抗体追踪感兴趣的蛋白质，因为它们能与特定靶标结合。

（Bradbury A, et al. Nature. 2015）

好的抗体是如何生产制备的呢？如果把抗体开发与重组蛋白表达类比：抗原便相当于表达载体，免疫动物就是表达宿主，而开发平台便是生产抗体的一个工具，通过对它们进行整合，开发生产出识别特定靶点、满足特定应用场景的抗体。

之前我们讨论了免疫动物对抗体开发的影响（抗体开发之物种选择）抗体开发平台的差异（抗体开发之平台选择），而作为抗体开发的第一步-免疫原准备，虽然尤为重要但总是让人忽略，很多时候在早期抗原设计上就已经决定了抗体开发的最终成败。而在抗原准备上需要回答以下问题：

• 抗原类型选择
• 抗原制备方式

抗原类型选择

抗原类型大致可以分为：细胞、多肽、蛋白、基因。兼顾开发成本和难度上进行决定：
细胞：靶点不明确，或蛋白重组表达难度大，需先筛选过表达细胞系。
多肽：在兼顾免疫原性的同时结合内源线性表位结构，保障WB线性表位验证的同时可以兼顾CHIP、IF或者其他复杂应用。

蛋白：免疫原位点多，成功几率高。针对结构复杂蛋白，常常采用重组表达后进行免疫原制备，尽可能地保障后续能够识别天然结构的IF、FC等应用场景；
基因：免疫技术难度和失败风险较高，一般搭配其他免疫类型共免疫。

抗原制备方式

对于细胞、多肽、基因免疫原，抛开方案设计，在制备中都是比较单一，而重组蛋白在制备中兼顾的因素会更多一些，涉及到了重组表达区段，表达载体，表达宿主等选择，这需要更为综合的评估。

重组表达区段：结合后期抗体应用，以及内源蛋白自身特性、结构等因素决定目的表达片段的取舍。

表达宿主：制备抗体的应用要求越高，对于免疫原蛋白制备要求越需要近似于内源蛋白的结构和修饰，这样才能保证外源重组蛋白免疫原造成的偏差越小。一般在原核大肠杆菌和真核哺乳细胞表达宿主之间进行取舍。
表达载体：在确定表达宿主基础上，基于标签、信号肽、启动子等多方考量设计。

汇总

 综合考虑多数采用多肽和重组蛋白作为抗原类型，在选择重组蛋白免疫原基础上，满足常规抗体应用需求（WB、CHIP、IF等）情况下可选择原核大肠杆菌进行制备重组蛋白，后续开发常为多克隆抗体。对于高质量单克隆抗体的制备上，尽量选择真核哺乳表达的重组蛋白抗原。

关于我们

武汉迈思生物科技有限公司立足于解决行业内功能活性蛋白及高质量、高通量抗体开发难的痛点，依托自建的两大核心平台：哺乳细胞蛋白表达平台和B细胞抗体开发平台，竭诚为广大科学研究机构和诊断、医药企业客户提供一站式抗体开发服务。公司业务涉及功能活性蛋白重组表达，科研应用、诊断应用、药用抗体早期发现的重组兔单克隆抗体开发，重组抗体表达，稳定细胞株构建等服务。