重组抗体表达服务
自1975年首次报道使用杂交瘤细胞株开发单克隆抗体 (mAb) 以来,无论是治疗性抗体还是检测、诊断抗体都快速蓬勃的发展。
自1975年首次报道使用杂交瘤细胞株开发单克隆抗体 (mAb) 以来,无论是治疗性抗体还是检测、诊断抗体都快速蓬勃的发展。抗体是基础和转化生物科学研究中大量应用而不可或缺的工具,然而,使用在动物身上产生的传统杂交瘤抗体或多克隆抗体存在诸多缺点。
可重复性:由于缺乏标准化和明确定义的抗体,在许多情况下,抗体的特征不完全,在分子水平上没有得到确认,并且在不同批次的性能上存在差异;
可持续性:不能保证传统产生的抗体的持续可用性,因为此类抗体的质量取决于维护和储存的稳定性,或在动物中持续生产的稳定性;
市售价格:对于许多研究人员来说,传统的市售抗体成本过高,进而严重限制了研究创新;
伦理问题:大量脊椎动物被用于生成用于生物医学研究的传统抗体。
为了解决这些问题,科研工作者不断开发实用的方法和工具:随着抗体质谱测序及杂交瘤测序发展,结合宿主细胞生产和纯化过程相关技术的进步,重组抗体的表达制造也在向前发展。表达宿主、表达载体、细胞培养基和生产纯化工艺的改进将抗体表达水平提高到每升几百毫克甚至克级水平。重组抗体避免了上面列出的许多关于传统抗体的问题:首先,使用从不改变的氨基酸序列产生的重组抗体提高了可重复性;其次,在确定序列后,重组抗体可永久使用;第三,可以使用低成本的表达和纯化系统大量生产重组抗体。
(重组单抗制备流程)
抗体序列分析:
通过获取抗体序列信息,结合软件及抗体库的数据化分析,明确抗体可变区具体氨基酸序列信息(便于后续抗体骨架设计)。
(抗体重轻链可变区框架示例)
抗体表达载体构建:
基于可变区序列信息,结合客户具体抗体类型及骨架亚型需求,构建不同抗体结构的表达载体。
(不同类型抗体骨架示例)
抗体重组表达验证:
依托哺乳细胞重组表达平台,根据不同需求量进行80ml、1L、5L、10L等表达体系的生产制备,同时进行相应纯化及验证,获得高纯度的特异性重组抗体。
(表达流程示例)
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