兔单B细胞-蛋白修饰性抗体开发

蛋白质在生物合成后进行的化学修饰称为翻译后修饰（PTM），通常引起蛋白质特性和功能的变化。PTM包括附加官能团的连接，例如甲基化、乙酰化、糖基化和磷酸化；小肽或蛋白质的共价偶联，例如泛素化和 SUMO化；或氨基酸的化学变化，例如瓜氨酸化（精氨酸转化为瓜氨酸）。蛋白质修饰在细胞生理过程中起着重要作用，不同的修饰状态下蛋白质的功能是不同的，而且不同位点的相同修饰也可能对蛋白质功能产生完全不同的影响。

（Zheng M, et al. Front Cell Dev Biol. 2022）

这种对蛋白表位修饰检测鉴定的问题，使得我们要借助高特异性抗体进行辨别区分。目前市面上售卖的大部分针对小分子和修饰性抗体，大多数抗体为兔源的多抗或单抗（数据来源：CiteAb官网以修饰类型关键词查找）。

（市面在售蛋白修饰抗体中不同物种来源占比）

兔源抗体以其高灵敏度和更小的识别表位，相比鼠源抗体，更适合用来开发识别针对蛋白修饰性位点的抗体，尤其是小分子修饰性抗体。武汉迈思生物科技有限公司基于自有兔单B细胞抗体开发平台，提供蛋白修饰性抗体一站式开发服务。

（单B细胞兔单抗开发流程）

蛋白修饰性抗体项目设计：

（蛋白修饰性抗体项目流程）

修饰型免疫原制备：

修饰型免疫原及非修饰型负筛选物制备，用于后续免疫及修饰型免疫原 ⁺ /非修饰型^- 阳性B细胞筛选，继而进行单B细胞培养。

（免疫原与负筛选物设计差异）

阳性B细胞克隆检测：

从阳性B细胞培养上清中ELISA正向/负向筛选确定特异性差异阳性B细胞、进一步完成后续分子克隆，重组表达。

（阳性B细胞检测）

抗体应用检测：

重组表达抗体多应用检测验证。

（抗体应用验证类型）

候选B细胞克隆：

对免疫后兔外周血及脾脏中B细胞，仅使用十分之一B细胞量就能筛选出大量阳性B细胞克隆，对于开发修饰性抗体提供了可靠的保障。