5× SmArt RT Master Mix

 

产品信息

产品名称	产品编号	规格
5× SmArt RT Master Mix	DY10502	100T

产品描述

本制品是2步法 Real Time RT-PCR 用的理想反转录反应试剂。5× SmArt RT Master Mix 中含有定量 RT-PCR 的反转录反应所需的所有试剂（SmArt RTase，RNase Inhibitor，Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Reaction Buffer），加入模板RNA和水，即可迅速进行反应，操作非常方便。使用该逆转录预混液20分钟内最长可获得12 kb甚至更长大小的cDNA。

产品组分

5× SmArt RT Master Mix（for Real Time）	400ul
RNase Free ddH2O	1ml×2支

5× SmArt RT Master Mix含有 SmArt RTase、RNase Inhibitor、Random Primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Reaction Buffer（含有 Mg2+）。

保存方式

-20℃保存。有效期12个月。

产品特点

• 制品为预先混好的 Premix 形式，只需加入模板 RNA 和水便可以开始反应。
• 使用无RNase H活性的M-MLV反转录酶，并且具有良好的热稳定性，反转录温度范围为37℃到60℃。
• 使用了Random Primers 和Oligo dT Primer 2 种反转录引物，可以合成适合 Real Time PCR 用cDNA。

操作方法

• 反转按下列组份配制 RT 反应液（反应液配制请在冰上进行）。

试剂	使用量
5× SmArt RT Master Mix（Perfect Real Time）	4 μl
Total RNA	*
RNase Free ddH2O	up to 20 μl

* 反应体系可按需求相应放大，20 μl 反应体系可使用 10ng-2000 ng 的 Total RNA和1-500ng 的mRNA。

 

• 轻柔混匀后进行反转录反应，条件如下:

 

25℃    5min

50℃ 15 min（反转录反应）,高GC模板可适当提高温度。

85℃ 5 sec（反转录酶的失活反应）

4℃

【注意】得到的 RT 反应液加入到下一步的 Real Time PCR 反应体系中，其加入量不要超过 Real Time PCR 反应体积的 1/10（V/V）

 

 

 

 

 

 

注意事项：

• 5× SmArt RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5× SmArt RT Master Mix粘度高，用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
• 分装试剂时务必使用新的枪头（Tip），以防止样品间污染。
• 本制品中已经加入了反转录 Primer（Oligo dT Primer和 Random Primers），如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应，则不能使用本制品。

 

 

 

本产品仅作科研用途