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科研人成功建立大鼠脑动脉瘤模型的7个步骤

发布时间:2022-08-10 15:31:16 I 企业名称:北京亿鸣复兴生物科技有限公司I 作者:
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脑动脉瘤是一种严重威胁人们生命和健康的常见脑血管性疾病其发病机理,一直是许多神经外科医师的研究焦点。建立和研究经济、有效的脑动脉瘤动物模型,是揭示其发病机理的很好方法。下面将从实验动物、器械及物品准备、实验具体步骤和实验要点四个方面进行详细介绍。

01

实验动物

 

 

正常SD大鼠,雌雄均可

 

02

器械及物品准备

 

 

1) 剃毛器
2) 75 %酒精+棉球、无菌纱布、生理盐水、10 %水合氯醛、2 ml注射器
3) 老鼠固定器(自制)、手术缝合包、6 号丝线、止血钳、刀片、手术剪、牵引钩、显微手术器械、体视镜

 

03

实验具体步骤

 

 

1. 麻醉:按照330 ul/100 g剂量腹腔注射10 %水合氯醛。

 

2. 麻醉后将大鼠以仰卧位固定在解剖板上,颈部备皮,消毒

 

3. 沿颈部正中切开皮肤。注意:切开皮肤前最好将结扎动脉的线事先剪好(后面会用到)。

 

4. 钝性分离皮下组织,在分离过程中会看到颌下腺,将腺体轻轻推到一侧,分离到气管前肌后,沿右侧胸锁乳突肌腱向下分离,见到颈动脉鞘后可用拉钩将皮肤肌肉固定好。

 

5. 此时可见到颈总动脉,分离左侧颈总动脉将其结扎。然后暴露右侧术野,分离右侧颈总动脉、颈外动脉及颈内动脉,先将颈外动脉游离、结扎及离断,然后在其深面沿着颈内动脉近侧向远侧寻找右侧翼愕动脉(pterygopalatine artery,PPA ),找到 PPA 后,将其游离、结扎。最后缝合皮下组织、皮肤,术后注意保暖。

 

颈总动脉结扎
 

6. 一周后进行双侧肾动脉后支结扎:使用相同方式将大鼠麻醉后,置于俯卧位定位最后一根肋骨下,背部中线右侧 1 cm 位置纵向切开皮肤 2 cm- 3 cm,小心钝性分离肌肉层,打开腹腔,此时用牵引钩拉开皮肤,棉签搽干净出血,右手食指跟中指轻轻挤压切口下面的腹腔,可以清晰看见肾脏。慢慢将肾从腹腔中挤出,左手用蘸有生理盐水的纱布包住肾脏轻轻提起,这时可以看见肾蒂部有脂肪血管,但无法分清血管位置及动脉位置,右手用小镊子慢慢将血管周围的脂肪剥离干净,直到看见 2 根较大的血管及白色的输尿管。上面一根颜色鲜红的为肾动脉,下面一个颜色较暗的静脉,最下面一根白色的细管为输尿管。

 

大鼠左肾背面

 

肾动脉后支结扎

 

7. 分离出动脉,在确认肾动脉分叉后使用 12 号丝线结扎肾后动脉,确认肾脏部分缺血坏死后,生理盐水冲洗术野至清亮后,缝合肌肉。同法处理另一侧肾后动脉后,缝合皮下组织、皮肤。术毕待其清醒后,放回笼盒单笼饲养。在术后1周给予盐水饲养,期间可通过血压测量评定模型效果。个月后,处死大鼠。

 

04

实验要点

 

 

• 在这项研究中动物模型制备关键一点就是结扎一侧的颈总动脉造成血液动力学明显改变也就是增加了对侧脑灌注。

 

• 在动脉分支和分叉处受到冲击的剪应力最大的部分是分叉的隆突部和分叉的远侧角,这正是最常发生动脉瘤的部位。并随作用时间的延长血管中的弹力组织和平滑肌层及动脉瘤壁中的胶原受到损害导致动脉瘤的长大甚至破裂

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