一起学习吧 | 免疫方案制定需考虑的三个方面

▼

你家的高质量的兔多抗是咋制造成功的？

抗原的选择与设计有啥诀窍？

免疫方案的确定与执行有啥秘诀？

抗体效价检测与抗体纯化有技巧？

................

今天我们就先来扒一扒免疫方案设计时

我们应该考虑的几点

▼

一、 时间

时间是最贵的东西，

从某种意义上来说，好的东西都是时间累积出来的。

无论物种如何，免疫反应都不可能急于自然过程。

1、要获得高滴度的抗原特异性抗体，需要给予免疫动物足够的时间来产生强烈的免疫反应。一般来说，兔多抗的滴度在初次免疫后 12周左右达到最高水平。

2、高亲和力、高特异性抗体产生、成熟需要时间相伴。鸬鹚兔多抗产品在免疫中，并不追求"快速"或"短期"效果，因为我们相信只有足够的时间，才能在动物体内产生针对靶抗原的高亲和力、高特异性的抗体。

抗体的亲和力反映对靶抗原暴露的适应性结合反应；

抗体的特异性取决于区分两种不同表位的能力。

3、快速、短期免疫计划的抗血清样本中可能存在较高水平的IgM。这是不可取的，我们期望获得的抗血清中已进行了完全的抗体类型转换，以确保抗血清具有高含量的IgG。

二、 免疫方式

给动物注射抗原的方式会影响兔多抗的效价、特异性、纯度和背景等质量指标，所以选择合适的注射方式是非常重要的。

∧从左至右依次为肌肉注射、皮下注射、静脉注射、皮内注射

注射抗原的路径选择一般需要考虑：

（1）要注射的体积

（2）要与免疫原一起注射的缓冲液和其他成分

（3）免疫原释放到淋巴或循环系统中的速度

对于兔子，我们通常在多点皮下部位进行大容量注射。

我们主要考虑：

1、皮下注射是最不痛苦的注射方式，因为脂肪层没有神经末梢，所以动物不会感到太大的疼痛。

2、皮下注射是最安全的注射方式，因为脂肪层有很好的隔离作用，可以防止感染和炎症，而且不会影响动物的血液循环和器官功能。

3、皮下注射是最有效的注射方式，因为脂肪层可以缓慢地释放抗原，从而刺激更强和更持久的免疫反应，产生更高水平和更高质量的抗体。

但是，最终的免疫抗原注射方式，还是需要根据最终研发效果绝对。

PS：

如果注射中包含佐剂或颗粒物质，则免疫原不应静脉内给予。

如果需要缓慢释放接种物，注射应该是肌肉内或皮内进行。

如果需要立即释放，可以使用静脉注射。

∧腿部肌肉注射（左）、腰椎周围肌肉注射（右）

∧颈部皮下注射

∧耳缘静脉-静脉注射

∧皮内注射

三、 采血频率与周期

采血频繁或一次性采血过多，并且与动物的体重不成比例，将对动物的健康和产品质量产生负面影响：

1）在出血期间消耗大量液体

2）将所有能量用于恢复体内必需分子和细胞的平衡，而不是通过产生高水平的特异性抗体来“对抗”抗原。所以可能导致抗血清将是稀释产品，其抗体滴度较低。

∧耳缘静脉采血（最常见且容易触及）

∧耳动脉采血（连续采集采血）

我们的采血周期保证动物每次出血后完全恢复。我们的出血间隔至少为3-4周。遵循欧洲准则，并在道德认可下提取最大8毫升/公斤的血液。这大约是动物总血容量的一半，确保了抗血清的生产。

打个总：

以上的几点的最终目的是：优化抗原特异性IgG抗体的产生，同时最大限度地减少背景（低中亲和力非抗原特异性抗体的存在）

小编只是简单介绍了免疫方案中需要重点考虑的三个方面。而在确保高质量抗体产生的免疫方案中，还涉及到其他许多因素，例如免疫动物的选择、免疫佐剂类型的选择、免疫试剂的配制与剂量等。

除了与免疫方案相关的因素外，多抗制备的其他环节，如抗原的选择与设计、血清效价检测、抗体纯化与功能性评估等，也会对最终产品的质量产生影响。如果您对以上提到的因素分析还有其他感兴趣的方面，欢迎通过微信后台私信留言，我们将很乐意为您提供更多信息。

公众号推送的部分图片文字来源于期刊或其他公众号平台，目的在于分享行业相关知识、传递最新资讯。文章版权属于原作者所有，如有侵权，请及时告知，我们会及时删除相关信息。

关注“鸬鹚生物”后，后台：

回复“免疫方案”，可查看《Animal Use Training Session Rabbit Lab Handout》。

回复“产品资料”，可查看下载鸬鹚生物2023年主推产品性能评测数据。

回复“抗体定向偶联”，可查看下载微信推文《一起学习吧 | 抗体的定向偶联》的全部参考文献。