重磅消息：胶体金标记，你不知道的“二三事”

自从凌思生物推出超高浓度胶体金以来，很多客户都有许多疑问，小编收集了一些常见的问题，并在此解答一下，希望对各位研发大佬能有帮助。

    一、高浓度金的pH是多少？

    高浓度胶体金的pH是中性的，因为成分很简单，只有纯化水和胶体金，所以各位大佬也不用冒着废掉一支pH计探头的风险来测量高浓度金的pH 了。

    二、怎么调pH?

     常规的胶体金，浓度比较低，一般4 OD以内，调pH需要用到酸碱以及pH计，因为胶体金的吸附性，往往调完一次pH，对pH探头都有一定的伤害，就算超声清洗，探头的灵敏度也会下降，通常调3-5次pH就得更换探头。

      而100OD的胶体金浓度高，体积小，pH试纸不准确，难道还要走pH计调节的老路子？？

       NO!!!

     凌思生物提供的胶体金是100OD（5mg/ml)的，通常建议是稀释至40OD进行标记。只要调整稀释液的pH，直接稀释100OD的高浓度胶体金就可以了。

      建议稀释液：

       全程缓冲液是0.01M的柠檬酸与0.005M的硼砂缓冲液，按照一定的比例混合，缓冲范围可以从pH3.0左右，缓冲至pH10.0左右。

常用比例如下（因检测温度影响，以下数据仅做参考）

  当然，对于标记环境没有要求的，直接纯化水稀释就OK 了。

    三、高浓度金标记效率怎么提升？

    之前有很多同行咨询小编，为什么用了高浓度金后，标记效率反而降低了？

    同学，我猜您可能遇上“钩状效应”了。小编的研发团队反复确认过，对于常规的IgG抗体蛋白，最高可省下80%左右的活材的，例如，如果您标记1ml 40OD的胶体金，那么添加50ug的IgG抗体就达到饱和状态了。并不是您常用的1 OD的金标记5ug/ml，40 OD就一定要标记200ug/ml。先试试50ug吧，有意外惊喜哦。

   另外，高浓度作业，若要反应充分，得反应时间充足，就如被100被稀释的果汁，和纯天然的鲜榨果汁儿，哪个更值得您细品呢？小编的建议标记时间为2小时，让抗体与胶体金充分接触，标记效率更高，实验数据更完美。

     四、封闭过程出现死金现象

     也有同行遇到其他问题，如标记过程完全正常，但是添加BSA封闭后就死金了。这是个常见的问题，因为BSA或者其他的封闭蛋白，在分离纯化过程中处理工艺不一致，造成BSA等的盐浓度过高或者携带重金属离子等，这样的BSA会引发一系列的问题，如灵敏度低、假阳性、干燥过程死金、甚至直接封闭死金等。小编的建议是更换不同厂家或者不同批次的BSA，或者直接选用非蛋白类的高分子聚合物，如聚乙二醇等。

       五、其他标记工艺

      除常规的物理吸附，胶体金还可以进行配位键标记，主要通过化学试剂将巯基嫁接到抗体蛋白上，巯基与胶体金形成稳定的配位键，从而达到标记蛋白的目的。

     关于更多胶体金的相关问题，大家如果有疑问可以直接公众号留言或者咨询我们的客户经理，我们不搞噱头，只想给您最实用的东西。

      高浓度胶体金可以帮您节省活材的同时，还能控制批间差，节省人工成本，缩短备货周期。

       道友，不考虑干一升“红酒”再走？

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