慢病毒介导的基因过表达和沉默
针对客户需要的目的基因进行基因克隆,测序,可选择装载到逆转录病毒或者慢病毒载体系统中,慢病毒载体系统可选择装载到dox诱导调控基因表达的系统。
基因沉默与过表达:
1. 细胞水平(特别是原代细胞)基因沉默是针对客人需要,对感兴趣的基因在细胞水平进行沉默。
实验流程:设计目的基因的干扰片段、构建慢病毒干扰载体(根据需要选择Dox诱导干扰基因表达的载体系统)、病毒包装、以及含有目的基因干扰片段的病毒导入细胞等。
服务对象:针对所用哺乳动物细胞,特别适合于瞬时转染试剂转染效率低、毒性大的原代细胞基因操作。
服务方式:该服务包括了干扰片段设计、序列合成、载体构建、测序验证、病毒包装以及含有目的基因的病毒导入细胞等。
2. 细胞水平(特别是原代细胞)基因过表达是针对客人需要的目的基因进行基因克隆、测序。可选择装载到逆转录病毒或慢病毒载体系统中,慢病毒载体系统可选择装载到dox诱导调控基因表达的系统。
服务对象:针对所用哺乳动物细胞,特别适合于瞬时转染试剂转染效率低、毒性大的原代细胞基因操作。
服务方式:该服务包括了基因克隆、载体构建、测序验证、病毒包装、以及含有目的基因的病毒导入细胞等。
延伸服务:
慢病毒介导的绿色荧光蛋白和萤火虫萤光素酶基因的永久性整合。
应用范围:适用于研究目的细胞被移植进实验动物以后,在动物体内不同位置的迁移,分布情况,从而实现移植细胞的追踪。特别是萤火虫萤光素酶标记的细胞,在小动物体内移植以后,可以利用小动物活体成像仪实现细胞移植后的活体细胞追踪。
服务方式:
(1)针对客户提供的细胞进行标记;
(2)针对客户需求,我们对原代细胞进行标记;
(3)直接提供可以标记细胞的慢病毒套装,客户根据使用说明对自己感兴趣的细胞进行标记。
慢病毒技术服务具体如下表:
技术服务项目 | 交 付 | 实验周期 |
过表达目的基因慢病毒包装 | 过表达混合液*1ml | 1个月 |
稳定过表达细胞株构建 | 稳转细胞株*1株、对照细胞株*1株 | 2个月 |
慢病毒液提供如下表:
技术服务项目 | 交付 | 滴度 | 实验周期 |
过表达病毒液 |
过表达混合液 0.5ml/管x10 对照组病毒液 0.5ml/管x10 |
5x106 PFU/ml | 1个月 |
干扰病毒液 (目的基因) |
干扰病毒液-1 0.5ml/管x10 干扰病毒液-2 0.5ml/管x10 对照组病毒液 0.5ml/管x10 |
5X106 PFU/ML |
1个月 |
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