转基因小鼠
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- 2022-12-01 16:02:26
武汉贝赛模式生物科技有限公司
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转基因小鼠是指将一段外源基因随机整合到小鼠基因组中,获得过表达该目的基因的小鼠模型。纤然生物采用PiggyBac 转座子系统实现表达目的基因转基因鼠的构建,PiggyBac转座子是一种通过“剪切&粘贴”式机制在载体和基因组间进行高效 移动遗传元件的系统。在转座时,转座醐可以特异性的识别位于转座子载体两端的反向末端重复序列(ITR),并有效的将ITR将其 之间的序列从转座载体上原有的位置剪切下来,然后高效的整合进染色体上的TTAA位点。
分类:根据插入位点是否确定,可分为随机转基因和定点转基因
1、随机转基因小鼠
制备流程:构建表达载体—>显微注射受精卵—>胚胎移植假孕母鼠—>鉴定并验证F0代—>获得阳性鼠
2、定点转基因
Rosa26位点是目前最为常用的定点整合位点之一。它位于小鼠6号染色体,是一个非编码基因,已被证明在大部分组织和细胞中都有表达。表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化,因此在这个区域定点插入外源DNA,在各组织中表达的可能性都非常高。所以,Rosa26被广泛用来作为外源基因表达的安全位点。
特点:
(1)获得模型唯一,不影响内源性基因表达
(2)遗传稳定性高
(3)无需筛选分析
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