嘌呤霉素（Puromycin；PM）是一种黑链霉菌属产生的氨基核苷抗生素,广泛用于抑制蛋白合成。作用原理是因其具有与tRNA分子中腺苷相连结的氨基酸末端类似的结构, 能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合,但是不能参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。嘌呤霉素对原核和真核生物的翻译过程均有干扰作用。

化学特性：

化学名称：3 (a -Amino-p-methoxyhydro cinnamamido)- 3–deoxy- N,N–dimethyladenosine·2HCl

CAS:53-79-2

分子式:C22H31Cl2N7O5

分子量:544.4314

保存条件

-20℃保存，有效期为两年；-4℃保存，有效期为一年；室温保存3个月。

嘌呤霉素可以室温运输，但收到后应立即-4℃保存。

实验步骤

1.在哺乳动物细胞中进行细胞筛选前，应先进行浓度梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度即杀死所有宿主细胞的最低浓度（一般哺乳动物细胞选用的有效浓度范围为1 - 10 μg/ml）。

2.细胞转染48h后,换上加入了适宜浓度嘌呤霉素的新鲜培养基，然后放入细胞培养箱中培养。

3.每隔3-4天换液，更换的培养基为含相同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基。

4.筛选7天后，评估剩余存活细胞是否全部为转染成功克隆。另外，这些克隆的筛选时间主要依赖于宿主细胞系种类和转染筛选效率。

5.筛选出的转染成功克隆用选择培养基培养7天，再进行后续实验。

注意事项

1.嘌呤霉素是一种有毒化合物，请小心拿放。

2.需加抗生素筛选的细胞，应为生长状态良好的细胞。另外，如果细胞密度过大将会影响筛选效率，因此，接种细胞的汇合度应不超过25%。

3.嘌呤霉素对大肠杆菌有效性较低，但对哺乳动物细胞中的有效性则较强。在转染实验中，它可以替代新霉素系统。