潮霉素B（Hygromycin B）是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的一种氨基糖苷类抗生素。它通过抑制细菌、真菌和一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来杀死这些生物。它的作用机理通过稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点，导致空载tRNA不能脱离核糖体，抑制了翻译的继续进行，因此，潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。而从科学界获得的hph基因则授予了表达它的细胞和载体潮霉素抗性。

化学特性：

CAS:31282-04-9

分子式:C20H37N3O13

分子量:527.53

纯度：>85%（HPLC）

保存条件：

-20℃或-4℃保存，有效期两年。

Hygromycin B可以室温运输，但收到后应立即-4℃或-20℃保存，室温保存三个月。避免反复冻融。

实验步骤：

1. 哺乳动物细胞中Hygromycin B 的一般工作浓度在200 ug/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

2. 转染48h后，换含适当浓度Hygromycin B的新鲜培养基。

3. 每隔3-4天换液，更换的培养基为含相同浓度Hygromycin B的新鲜培养基。

4. 筛选7天后，评估剩余存活细胞是否全部为转染成功克隆。另外，这些克隆的筛选时间主要依赖于宿主细胞系种类和转染筛选效率。

5. 筛选出的转染成功克隆用选择培养基培养7天，再进行后续实验。

注意事项：

1． Hygromycin B是一种有危害的化合物。避免接触眼睛，皮肤和衣服。

2． 需加抗生素筛选的细胞，应为生长状态良好的细胞。另外，如果细胞密度过大将会影响筛选效率，因此，接种细胞的汇合度应不超过25%。