Universal Direct Taqman qPCR Master Mix(2×)
- CRP02386S
- CretBiotech
- 江苏省苏州市
- 现货
- 1mL
- 5mL
- 10mL
- 2023-10-25 10:15:06
苏州白垩纪生物科技有限公司
产品简介
本制品为采用探针法(Probe)进行Real Time PCR(qPCR)反应的专用试剂。产品经过了特殊制备工艺,完全去除了宿主DNA残留;经过优化的配方,可被制成冷冻干燥制剂;适用于针对血液、唾液、拭子、组织、植物、微生物等样本提取的基因组DNA、病毒DNA、质粒DNA,以及反转录的cDNA 等进行荧光定量分析,同时可用于对唾液、口腔拭子、组织、血卡、植物等样本进行免核酸提取Direct qPCR检测。
本产品常用于基因含量检测、基因分型等用途。本产品含有经抗体封闭的热启动Taq DNA聚合酶(Hot-Start Taq),配合条件优化的热启动qPCR专用缓冲体系,可有效避免类似于非热启动型Taq聚合酶导致的非特异性扩增反应,从而提高PCR扩增效率;同时也能够针对不同GC含量的基因完成扩增,获得高灵敏度的qPCR测试结果。本产品在宽定量区域具有极佳的线性检测能力,用户通过优化设计的引物和探针就可以对靶基因进行准确定量,具有重复性好、可信度高等优点。
产品特点
1. 制品已去除宿主DNA残留;
2. 可被制成冷冻干燥制剂(用户根据需要选择工艺或联系我司技术支持);
3. 适用于针对纯化后的DNA进行探针法qPCR反应,亦可用于针对多种样本进行免核酸提取Direct qPCR检测;
4. 制品为2×浓度的预混试剂,使用简单、方便;
5. 产品使用了抗体封闭的突变型Taq酶,可以进行Hot Start法PCR反应,与特别开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率、高扩增灵敏度的特点。
运输及保存条件
运输条件:-20℃~8℃运输;
保存条件:-20℃长期保存,或4℃短期(小于1周)保存。
注意事项
1. 使用前上下轻柔颠倒容器数次,确保各试剂成份完全混匀,试剂如未充分混匀可能导致反应性能下降。可短暂离心15~30秒收集试剂至容器底部。切勿使用涡旋震荡等剧烈混匀方式以免产生气泡;
2. 放置于4℃的保存时间不应超过1周,长期保存请置于-20℃;
3. 配制PCR反应Master Mix,在各成份加毕后需涡旋混匀并进行短暂离心;
4. 请避免核酸酶污染样本,否则可能造成扩增反应出现困难的情况;
5. 产品中含有对光敏感的成份,应避免强直光照射;
6. 本产品仅供科学研究使用。
性能实例
- 数字PCR检测分析 (无宿主DNA残留)
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使用白垩纪Universal Direct Taqman qPCR Master Mix(2 ×)和进口Supplier M和Supplier A提供的同类型试剂,使用数字PCR对几十种细菌进行定量检测,从结果看,白垩纪和Supplier M提供的预混液无宿主残留的污染,而Supplier A提供的预混液在NTC的三个通道中都有阳性扩增,表明在嗜麦芽、奇异变形、洋葱伯克霍尔德复合体的检测中会出现假阳性。此外对不同细菌的阳性样本进行检测,结果表明白垩纪的预混液相比其他两家的灵敏度更高。
2. 液体与冻干PCR试剂的性能对比
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使用白垩纪Universal Direct Taqman qPCR Master Mix(2×, DNA free Lyophilization)液体试剂和冻干试剂对提取的呼吸道三种细菌DNA进行多重扩增,结果显示不管是使用高浓度模板还是低浓度模板(冻干前后分别2个平行),液体试剂盒冻干试剂的扩增曲线基本重合,Ct值接近,冻干前后的信号值也未下降。这说明冻干后酶的活性并未损失。
3. 冻干PCR试剂提高了检测灵敏度
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使用白垩纪Universal Direct Taqman qPCR Master Mix(2×, DNA free Lyophilization)液体试剂和冻干试剂对提取的病毒DNA(ASFV)进行扩增检测,液体试剂按照说明书加入5μL提取DNA模板,而冻干试剂加入25μL 提取DNA模板,结果显示冻干试剂与液体试剂的信号值接近,但是Ct值提前约2个,这大大提高了检测的灵敏度。
4 冻干试剂(粉末)的加速热稳定性
- 冻干试剂中加入多重靶标进行冻干,在50℃条件下对冻干试剂(粉末)进行热稳定加速实验,50℃放置1个月冻干试剂的形态和性能没有发生任何改变。