案例分享——普健生物 Xten™ Mab Single B兔单克隆抗体开发

发布时间：2022-10-27 09:31:49 I 企业名称：普健生物（武汉）科技有限公司 I 作者：

概述

兔单抗与传统的杂交瘤鼠单抗相比具有更好的抗原识别功能。由于兔骨髓瘤细胞株受专利保护，无法利用杂交瘤技术开发兔单抗，普健生物建立了噬菌体展示抗体文库技术平台以及新型的Xten™ Mab Single B兔单克隆抗体开发技术平台。

单个B细胞抗体制备技术是近年来新发展的一类快速制备单克隆抗体的技术，是根据每一个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列，以及每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性，从免疫动物脾组织或外周血中分离抗原特异性B细胞，通过单细胞PCR技术从分泌抗体的单个B细胞中扩增IgG重链和轻链可变区基因，然后在哺乳动物细胞内表达并获得具有生物活性的单克隆抗体。

图1. Xten^TM Mab 兔单克隆抗体开发流程

SERVICE

服务内容

普健生物

Xten™ Mab Single B兔单克隆抗体开发服务项目表

服务项目	客户提供	服务内容	服务周期	交付内容
Xten™ Mab 兔单克隆抗体开发	抗原序列	抗原制备	20-24周	100µg/株单抗
		动物免疫		pUC质粒
		脾细胞分离及阳性B细胞筛选		pUC质粒
		阳性克隆抗体可变区扩增及测序分析		3株最优的抗体序列
		重组抗体表达及纯化		技术服务报告

SHOWCASE

案例展示

利用B细胞分选富集策略，在流式分选设备的支持下，有效富集抗原特异性B细胞，提高B细胞体外培养的成活率，保留B细胞的多样性，可开发出不同应用需求的抗体。

XtenTM Mab 兔单克隆抗体开发之B细胞筛选.png

图2.Xten^TM Mab 兔单克隆抗体开发之B细胞筛选

使用普健生物XtenCHO^TM高密度瞬转表达系统，体外重组表达部分阳性抗体，纯化后进行功能验证。

图3. XtenTM Mab 兔单克隆抗体开发之重组抗体表达.png

图3. Xten^TM Mab 兔单克隆抗体开发之重组抗体表达

重组表达纯化后的抗体可进行ELISA、WB、流式等功能性分析。

重组表达纯化后的抗体可进行ELISA、WB、流式等功能性分析.png

_	A	B	C	D
EC50(ng/ml)	6.897	145	15.48	23.43

图4.Xten^TM Mab 兔单克隆抗体开发之重组抗体ELISA检测结果

关于普健

普健生物（AtaGenix）于2012年在武汉成立，作为武汉国家生物产业基地公共服务平台—光谷抗体发现与筛选公共服务平台。普健生物（AtaGenix）专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。经过10年的发展，普健生物已成为一家立足武汉，业务覆盖全国、辐射全球的高新技术服务企业。目前公司拥有4200平米自建实验室（包含800平高标准BSL-2级细胞房），拥有齐全蛋白抗体开发设备500余套，包括高通量蛋白纯化仪、Agilent 流式细胞分析仪，全自动HPLC分析仪，openSPR蛋白、抗体亲和力测定仪，Olympus荧光显微镜， BTX电融合仪，2*7L微生物发酵罐，中试型高压均质机，全自动管式化学发光仪，以及配套的高速离心机，细胞计数仪及大容量细胞培养摇床。公司先后获得荣誉：3551人才计划、高新技术企业、技术先进型服务企业、光谷瞪羚企业