耐dUTP高保真酶,助力甲基化测序
DNA聚合酶是PCR反应的核心组分,广泛应用于生物及医学研究等领域。对于普通PCR,常规热稳定DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)即可满足需求。但对于高通量测序,扩增产物的准确性非常关键,优选高保真酶进行扩增。
DNA甲基化测序是研究生物体内基因调控的重要技术手段,越来越多地应用于肿瘤早筛、诊断等技术中。全基因组重亚硫酸氢盐测序(WGBS)是甲基化检测的金标准,在WGBS文库构建过程中,样本DNA经重亚硫酸氢盐处理后,非甲基化的胞嘧啶(C)会转化为尿嘧啶(U),甲基化的C则保持不变。在后续PCR扩增中U会转变为胸腺嘧啶(T),但常规高保真酶不能以含有dUTP的DNA作为扩增模板,因此需要经过特殊改造耐受dUTP,从而应用到甲基化文库构建或者定点突变等技术中。
图1. WGBS建库的两种技术路线[1]
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是翌圣经过定向改造,针对含尿嘧啶(U)模板推出的一款高保真DNA聚合酶,具备优良的扩增性能。产品本身不仅具备高扩增效率、高灵敏度和高特异性,而且酶本身各项残留均很低,满足各种模板类型的扩增需求。
性能展示
01
高扩增产量:与进口品牌K*产量相当
图3. A:分别使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(蓝)、N*(绿)、V*(灰)在100ng Bisulfite 处理后DNA起始量实验条件下建库,建库纯化后文库产量高于其它品牌。
B: 分别使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(蓝)、N*(绿)、V*(灰)在100ng λDNA起始量实验条件下建库,建库纯化后文库产量与品牌K*相当,高于品牌N*以及V*。
02
无切口酶残留
图4. 切口酶残留结果:跑胶结果显示Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与阴性对照(C)一致,无切口酶残留。
产品订购
产品定位
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产品名称
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产品货号
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耐dUTP扩增酶
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Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (1 U/μL)
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10145ES
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高浓度耐dUTP扩增酶
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Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL) Hieff Canace® 耐U+高保真DNA聚合酶 (3 U/μL)
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14384ES
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高效率TdT末端转移酶(带buffer)
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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase TdT末端转移酶
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10302ES
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高效率TdT末端转移酶(不含buffer)
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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μL, without buffer) TdT 末端转移酶
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14456ES
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高效率连接酶
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E. coliDNA ligase (60 U/μL)
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14955ES
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DNA纯化/分选磁珠
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Hieff NGS®DNA Selection Beads
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12601ES
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文库定量试剂盒
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dsDNA HS Assay Kit
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12640ES
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甲基化建库试剂盒
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Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina 甲基化DNA建库试剂盒
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12211ES
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