RPA等温扩增│Bsu DNA polymerase (Large fragment)
重组酶聚合酶扩增RPA是一种近年来发展起来的等温扩增技术，具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且检测时间短等优点，特别适用于基层和现场即时检测。
RPA等温扩增技术简介
RPA技术的原理是重组酶蛋白与引物（A）形成复合物，能在双链DNA中寻找同源序列（B）。然后通过重组酶（C）的链置换活性将引物插入同源位点，并且单链结合蛋白稳定置换DNA链（D）。随后重组酶被分解，使得引物的3'末端被链置换并与Bsu DNA polymerase (Large fragment) 结合（E），使其延长引物（F），通过循环重复该过程对模板上的目标区域进行指数式扩增。
该技术可用于不同种类的目标生物检测，样本耐受性高，可广泛覆盖疫病防控、医学诊断、食品安全、环境卫生、农业病害、动物健康、生物制品质控等应用领域。
图1.RPA等温扩增技术原理图[1]
Bsu DNA polymerase (Large fragment)是RPA等温扩增的核心酶，具有较强的链置换活性和聚合酶活性，能在恒温条件（37~42℃）下快速、高效、特异性的扩增模板，在10~30 min内即可将痕量的核酸模板（低至单拷贝）扩增至可以检出的水平。
翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment)
翌圣生物Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) （Cat#11078ES）来源于嗜热脂肪芽孢杆菌，该酶保留了Bsu DNA polymeras I的5´-3´聚合酶活性，但缺失了5´-3´核酸外切酶结构域，具备纯度高、残留控制严格、单次产能高，可确保批间稳定性的产品优势，可广泛应用于基于等温扩增RPA技术的病原体即时检测。
性能展示
1. 无核酸外切酶、切口酶及RNase残留
图2. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) 核酸外切酶、切口酶残留检测。
注：C代表阴性对照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)
图3. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) RNase残留检测。
注：C代表阴性对照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)
2. 高效链置换活性，构建RPA扩增体系灵敏度低至10 copies/T
图4. 用翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)进行RT-RPA反应，扩增RNA病毒，灵敏度低至10 copies/T。
选择指南
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产品定位
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产品名称
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产品货号
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RPA相关酶原料
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Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)
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11078ES
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T4 UvsX Recombinase(2 μg/μL)
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11079ES
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T4 UvsY protein (2 μg/μL)
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11080ES
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T4 gene 32 protein (gp 32) T4噬菌体基因32编码蛋白
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11081ES
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肌酸激酶Creatine Kinase (2 μg/μL)
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14502ES
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高灵敏度Bst酶
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Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)
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14402ES
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Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)
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14403ES
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无甘油Bst酶
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Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL，Glycerol-Free)
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14405ES
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适合RT-Lamp的逆转录酶
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Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐热逆转录酶
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11111ES
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第五代耐热逆转录酶Hifair® V Reverse Transcriptase(1000 U/μL)
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14603ES
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Hifair® III Reverse Transcriptase,600U/μL,Glycerol-free 第三代耐热逆转录酶(无甘油版)
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11297ES
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鼠源RNase抑制剂
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Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂
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10603ES
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鼠源RNase抑制剂 Murine RNase Inhibitor(200 U/µL)
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10610ES
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鼠源RNase抑制剂 Murine RNase Inhibitor(300 U/µL)
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14671ES
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Murine RNase Inhibitor(200 U/µL,Glycerol-free)
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10703ES
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防污染UDG酶
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Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL
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14455ES
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染料法RT-Lamp显示试剂盒
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RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)
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13762ES
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pH敏感染料法RT-Lamp显示试剂盒（可冻干）
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RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit
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13920ES
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参考文献
[1] 施奕,徐昌平,余蓓蓓,卢亦愚,梅玲玲.重组酶聚合酶扩增技术研究进展[J].病毒学报, 2020,36(03):522-532.
[2] Zhao Y, Chen F, Li Q, Wang L, Fan C. Isothermal Amplification of Nucleic Acids. Chem Rev. 2015 Nov 25;115(22):12491-545. doi: 10.1021/acs.chemrev.5b00428. Epub 2015 Nov 9. PMID: 26551336.
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