Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)
- M036
- 近岸蛋白
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- 2023-02-03 09:46:49
苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
无机焦磷酸酶(PPase)可催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐:P2O74-+H2O+PPase→2HPO42-。应用于核酸扩增实验中,PPase可水解随着反应生成的无机焦磷酸盐,避免其对反应体系的抑制。
自然条件下,无机焦磷酸酶可以为蛋白、RNA和DNA的生物合成反应提供热力学动力,并在脂代谢,钙吸收以及骨形成等生物转化过程中发挥作用。
近岸蛋白质无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的ppa基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA内含肽的融合基因。该酶在实验应用中能够高效发挥作用,保证反应的进行。
优化RNA转录:提高体外转录反应的RNA产量;
优化PCR反应:提高效率,增加DNA产量;
去除利用焦磷酸盐测定法来进行SNP基因分型的试剂中的PPi污染物;
促进蛋白质、RNA和DNA的合成;
催化PPi + H2O→2Pi的反应。
水解无机焦磷酸盐;
DNA合成:显著增强DNA复制能力;
RNA合成:体外转录反应中提高 RNA 产量;
热稳定性:最佳反应温度为25℃,65℃ 10min可使该酶失活。
-20℃保存。
1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带, qPCR方法检测无大肠杆菌基因组残留;无RNase、核酸内、外切酶污染。
1) 该酶在多种反应Buffer中均具有活性,通常该酶在HDA扩增、LAMP扩增等实验中,可直接接入即可。
2) 该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在0.05~1U/ml浓度调整;
3) 该酶的最佳反应温度为25℃,其在16~37℃均有活性,65℃ 10min可使该酶失活。