进一步发展干细胞研究

CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)

 

 

CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。

研究表明，CEPT可防止人ES/iPS细胞（人多能干细胞；hPSCs）在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤^1）。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似，可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。

此外，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率^1，2，3）。

FUJIFILM Wako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液，可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。

 

 

 

◆特点

 

●　从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞，维持细胞结构与功能

●　已进行过滤灭菌的即用型混合溶液

●　已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列

 

 

◆测试项目

 

●　浓度（HPLC）：已通过测试

●　外观：液体

●　内毒素：<3 EU/mL

●　已完成无菌测试

●　已完成支原体阴性测试

 

 

◆使用方法

 

　　以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。

 

 

※使用注意

●　本产品为冻存品（-20°C）。为避免反复冻融，建议根据使用量分装冻存。

●　溶解时可能会出现沉淀，并非产品质量问题，请直接使用。

　（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）

 

 

 

◆适用范围

 

样品：人ES/iPS细胞

应用：

 

◆性能数据

 

　　添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure^® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO₂的条件下培养人iPS细胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm²）。

　　培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。

　　培养第8天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数细胞集落。

 

 

 

 

单细胞克隆测试

 

　　添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure^® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO₂的条件下培养人iPS细胞201B7株（96孔板）。

　　培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。

　　培养第13天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数形成细胞集落的孔数与空孔数。

　　通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比，计算细胞集落形成率。

 

 

【结果】

细胞接种数少时，添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。

 

 

未分化人iPS细胞的维持确认

 

【细胞株】人iPS细胞201B7株

【培养基】StemSure^® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF

Red: rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）

Blue: DAPI (细胞核染色)

※　BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素

 

 

添加CEPT时

添加Y-27632时

 

【结果】

添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化维持状态。

 

 

◆产品列表

 

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×）	细胞培养用	300 μL

 

相关产品

 

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
197-17571	StemSure® hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基	细胞培养用	100 mL
193-17573			100 mL×4
062-06661	bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性）	细胞培养用	50 μL
068-06663			50 μL×4
195-16031	StemSure® Freezing Medium StemSure® 细胞冻存液	细胞培养用	100 mL
192-19081	StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂	细胞培养用	100 μL
035-24593	CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure™ 10mmol/l Y-27632 溶液，无动物源	细胞培养用	1 mL
039-24591			300 μL
259-00613	Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂	细胞培养用	5 mg
257-00614			25 mg
030-24021	CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂）	细胞培养用	1 mg
036-24023			5 mg
034-24024			25 mg
030-24026			100 mg