Heat Sensitive Phosphatase (HSP)
- M003-1
- 近岸蛋白
- 上海市
- 现货
- 200U
- ¥458
- 2023-02-03 09:46:49
苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
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产品描述
本酶为南极嗜冷菌株TAB5中分离的磷酸酶基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。磷酸酶能催化除去DNA或RNA末端的5´ 磷酸基团。在克隆时将载体DNA用热敏性磷酸酶处理后其片段缺少连接酶所必须的5´ 磷酸末端,因此载体不能进行自连接,可以大大降低载体自连的背景。该酶可以作用于5´突出末端、凹陷端和平末端。
产品用途
1) 除去载体5´末端的磷酸基团,减少自连背景;
2) 去除PCR产物中残留的dNTP和焦磷酸盐;
3) 除去DNA探针5´末端的磷酸基团,为5´末端磷酸化标记准备最适底物;
4) 蛋白质的去磷酸化。
保存条件
-20℃。
活性定义
在37℃、30分钟条件下,能使1μg经Hind III(产生5´突出末端)、EcoR V (产生平滑末端)或Pst I(产生5´凹进末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定义为一个单位。
质量控制
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
使用建议
热敏性磷酸酶在1×HSP Buffer中有最适酶活力。如果要在限制性酶切Buffer中进行反应,必须在反应体系中添加10×HSP Buffer至1×终浓度,37℃温育。