昆虫杆状病毒表达系统(重组蛋白表达)
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- 2022-09-26 17:03:59
普健生物(武汉)科技有限公司
服务简介
昆虫杆状病毒表达系统 (BEVS) 是一种利用杆状病毒作为外源基因的载体,通过感染昆虫细胞或者昆虫幼虫来表达外源蛋白的系统,是重要的真核表达系统之一。
1.昆虫杆状病毒表达系统的优势:
a.杆状病毒安全性好
b.携带外源基因的容量大
c.外源目的蛋白质表达水平高
d.表达的真核基因产品可以进行正确的折叠与修饰,因而具有良好的生物活性。
2.与哺乳细胞相比昆虫表达系统的优势:
a.培养条件相对简单,不需要CO2
b.不容易被细菌污染
c.能进行蛋白翻译后糖基化修饰
d.大规模生产条件简单,更易获得大量蛋白
Vector | Features |
pFastBac1 | Strong AcMNPV polyhedrin (PH) promoter for high level protein expression Large multiple cloning site for simplified cloning |
pFastBacHT | Strong polyhedrin (PH) promoter for high-level protein expression N-terminal 6His tag for purification of recombinant fusion proteins using metal-chelating resin and a TEV protease cleavage site for removal of the 6His tag following protein purification Vector supplied in 3 reading frames for simplified cloning |
pFastBacDual | Two strong baculovirus promoters (PH and p10) to allow simultaneous expression of two proteins Two large multiple cloning sites for simplified cloning |
细胞 | 来源 | 用途 |
Sf9 | Sf9细胞系克隆分IPLBSF21-AE(Sf21),来源于秋蝇蠕虫(草地夜蛾)蛹的卵巢组织 | 适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白 |
Sf21 | Sf21细胞衍生于IPLBSF-21细胞系,也来源于秋蝇蠕虫(草地夜蛾)蛹的卵巢组织 | 也适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白。在一些结构上Sf21细胞可能比Sf9细胞表达蛋白量高 |
Hi5 | Hi5细胞系源于博伊斯汤普森研究所对植物的研究和源于白菜尺蠖卵巢细胞,粉纹夜蛾细胞 | Hi5细胞表达重组病毒性能优越, 经常用于转染和空斑纯化,也适用于表达分泌型重组蛋白 |
S2 | S2是一种果蝇晚期胚胎细胞。其中多为雌性四倍体细胞,也有双倍体细胞 | 比较适合重组蛋白的表达 |
服务优势
1.普健生物利用经典Bac-to-Bac技术,打造了一个快速简便高效的杆状病毒表达平台;该技术能够快速地产生重组病毒,而且不需要繁琐的空斑分析,大大提高了效率
2.蛋白生产的周期短,通量大。可以实现细胞从小规模培养到大规模发酵的过程,使得蛋白产物甚至可以达到100mg/L的级别
3.提供免费的病毒粒子扩增和储存服务,储存期长达2年
服务内容
服务内容 | 客户提供 | 服务步骤 | 服务周期 | 交付内容 |
昆虫杆状病毒表达系统 | 基因序列 载体 |
基因合成及密码子优化(可选) 载体构建 病毒包装及扩增 表达纯化测试 大规模发酵及纯化 |
6-8周 | 蛋白样品 技术服务报告 |
案例展示
昆虫系统表达绵毛嗜热丝菌 (Thermomyces lanuginosus)TRIase 酶蛋白
普健生物(武汉)科技有限公司于2012年在武汉成立,作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台,具备优越的技术实力和国际化发展的战略格局,专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。
公司大楼坐落于东湖新技术开发区神墩四路, 这里绿叶繁茂,道路宽敞,周围有一众生物科技型高新企业。普健生物作为一员加入此处,为周遭增添了一抹亮丽的色彩。
公司立足于生命科学领域,自主建立三大完善的技术服务平台:生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台。生命科学平台:拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞),鼠/兔单克隆抗体平台,可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务。诊断原料开发平台:拥有开放式化学发光自动平台,可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险,为广大客户提供各种诊断核心原料开发。抗体药物发现平台以杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主,目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有:新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库。同时也开发了大量的重组蛋白、抗体、工具酶、药物对照抗体、工业酶、诊断原料等相关产品。
目前已拥有的自主技术包括:哺乳动物细胞重组蛋白表达系统、稳定细胞株构建、噬菌体文库的构建以及淘选、DNA免疫技术、化学发光免疫诊断抗体筛选技术等等。截止目前已成功交付数万例与重组蛋白、抗体相关的技术委托研发,客户以及合作伙伴涵盖了国内外优秀的学术研究机构以及制药公司;并且与FIND(创新诊断基金会)、BAYER(拜耳作物科学)、广州呼吸健康研究院建立合作关系;与青岛大学附属医院医学研究转化中心,苏州系统医学研究所,广州再生医学与健康广东省实验室建立战略合作关系。
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