β-羟丁酸在检测糖尿病酮症酸中毒诊断、治疗中有重要意义，对糖尿病的早期诊断也有重要意义。
β-羟丁酸在β-羟丁酸脱氢酶催化下生成乙酰乙酸。同时氧化型辅酶Ⅰ被还原成还原型辅酶Ⅰ即NADH，NADH接着与WST-8显色剂生成于450nm有特征吸收峰的黄色物质，通过检测该黄色物质于451nm处的增加量，即可计算得出样本中β-羟丁酸含量。