G418是一种红橙小单孢菌属产生的与庆大霉素B1结构相似的氨基糖苷类抗生素，是被用于表达neo基因的真核细胞的选择和维持。它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。

保存条件：

溶液-20℃保存；-4℃保存，有效期最少为一年。

G418可以室温运输，但收到后应立即-4℃保存，干粉室温保存。

实验步骤：

• 在进行细胞筛选前由于每种细胞对G418的敏感性不同，不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性也不尽相同，因此，应先进行浓度梯度实验确定在10～14天内杀死所有宿主细胞的最低浓度（一般的最佳浓度400ug/ml）。具体如下：将细胞稀释到1000个细胞/mL，每孔100ul加入有培养基的24孔板，在100ug/mL～1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。维持浓度为筛选浓度的一半即可。
• 转染48h后，换含适当浓度G418的新鲜培养基。
• 每隔3-4天换液，更换的培养基为含相同浓度G418的新鲜培养基。
• 筛选7天后，评估剩余存活细胞是否全部为转染成功克隆。另外，这些克隆的筛选时间主要依赖于宿主细胞系种类和转染筛选效率。
• 筛选出的转染成功克隆用选择培养基培养7天，再进行后续实验。