pTO-T快速克隆试剂盒利用拓扑异构酶I（Topoisomerase I）的切割再连接的特点将片段克隆到载体中。适用于克隆由Taq DNA聚合酶扩增的3’端带有“A”末端的产物。载体元件包含高拷贝的复制子，Amp抗性基因，可以用引物对M13F(-47)和M13R(-48)进行菌落PCR鉴定阳性克隆。