细胞消化与解离试剂

 

产品货号	产品名称	包装规格
B-XH01	0.05%胰蛋白酶溶液（溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH02	0.05%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH03	0.05%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH04	0.05%胰蛋白酶溶液（溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH05	0.05%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH06	0.05%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH07	0.25%胰蛋白酶溶液（溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH08	0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH09	0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于PBS）	100mL/瓶
B-XH10	0.25%胰蛋白酶溶液（溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH11	0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH12	0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于D-Hank's）	100mL/瓶
B-XH13	0.02% EDTA溶液	100mL/瓶
B-XH14	0.5% EDTA溶液	100mL/瓶

 

胰蛋白酶消化液说明书

 

【产品名称】

胰蛋白酶消化液

【包装规格】

100 mL/瓶*12瓶/箱、250 mL/瓶*12瓶/箱、500 mL/瓶*12瓶/箱 等

【产品简介】

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等。胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰蛋白酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰蛋白酶浓度、温度和作用时间有关，在PH 8.0和37℃时，胰蛋白酶的作用能力最强，因此使用胰蛋白酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰蛋白酶的工作浓度为0.25%，而半贴壁细胞或对胰蛋白酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰蛋白酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca²⁺和Mg²⁺，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。

【使用方法】

1. 贴壁细胞的消化：

a）吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

b）加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，一般细胞37℃放置1分钟左右。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c）显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸

 

除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

d）如果发现消化不足，可加入消化液重新消化。

e）如果发现细胞消化时间过长，未及时吹打细胞，则直接把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰蛋白酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

2. 组织的消化：

不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

【产品特点】

◆本产品采用0.1μm滤膜过滤除菌，无需高温高压灭菌，开瓶即用，效率更高，通常室温1-2分钟左右就可以消化大多数贴壁细胞。

◆本产品通过无数次的反复试验验证，溶液稳定性可靠，拥有严格的质量检测，符合药典相关标准。

◆提供不同配方的胰蛋白酶消化液，满足各类客户需求；

【贮藏方法和使用期限】

-20°C保存12个月；4°C保存不超过3个月；避免反复冻融。

【可选组分】

酚红、EDTA、PBS平衡盐、Hanks'平衡盐等。

【注意事项】

◆收货后尽快放入保存温度，避免长时间常温保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存；

◆本产品经过滤除菌，使用时应注意无菌操作，避免污染；

◆由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况。

◆本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断等领域。