I 简介

该产品是本公司自行研发生产的专用于原代细胞复苏过程的培养基。经过测试该产品能最大程度上减少了细胞复苏后活力的丢失，大大的提升了每一管细胞的复苏效率。

II 试剂与耗材

-复苏培养基（Cat#LV-Rec001/002/003）               

-冻存原代细胞

-碎冰及冰盒                                       

-无菌15ml离心管

-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）

-自动移液枪

-恒温水浴锅                                       

-冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）

-生物安全柜

III 复苏方法（具体使用请遵照特定细胞说明书进行）

• 将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中，紫外消毒15min；复苏培养基放碎冰中充分预冷；4℃预冷离心机；水浴锅调至38℃。
• 将冻存的原代细胞从冷藏位置迅速转移至38℃恒温水浴锅中，尽可能多的浸入38℃水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管管盖保持在水面以上。
• 解冻冻存管约90~120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
• 用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
• 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至预冷的15ml离心管中（可用约1ml复苏培养基润洗一遍枪头和冻存管）。
• 一边轻微摇晃细胞悬液离心管，一边向细胞悬液逐滴加入复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），最后轻微上下颠倒1次混匀。
• 根据原代细胞种类选择适合的离心速度和时间，4℃离心，去掉上清并用相应培养基重悬后即可铺板到培养板中进行培养。