15种新冠病毒检测试剂方法及原理

针对病毒感染引起的传染病，为了明确致病的病毒种类，可以进行以下两类检查：

直接检测病毒本身：可以检测病毒表面的抗原，也可以检测病毒的核酸。

检测人体为了抵抗病毒产生的抗体。

通常情况下，抗原检测对实验室条件要求不高，主要适用于基层医院进行的大规模筛查；抗体检测操作方便，10~15分钟即可获得检测结果；而核酸检测则对实验室条件、检测人员、仪器要求高，但结果也最为准确和敏感。

截至目前，国家药品监督管理局共批准新冠病毒检测试剂15个，其中核酸检测试剂10个，抗体检测试剂5个，没有批准病毒抗原的相关检测。

下面，我们针对新冠病毒的核酸检测和抗体检测已获批的方法进行介绍。

传送门：病毒核酸检测

目前已批准的10个新冠病毒核酸检测试剂，有8个采用的都是荧光PCR法，剩余的检测方法分别是联合探针锚定聚合测序法和恒温扩增芯片法。

荧光PCR法

PCR法指的是聚合酶链式反应，能将微量的DNA大幅增加。用于检测新冠病毒时，由于新冠病毒是RNA病毒，需要先将病毒RNA逆转录为DNA，再进行PCR检测。

荧光PCR检测的原理为，随着PCR的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。最后通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。

这是目前新冠病毒核酸检测最常用的方法。但下列因素可能导致检测结果出现误差：

保存不当或未及时送检：RNA病毒很容易降解，因此，获得患者样本后，需要规范地保存，并尽快进行检测。否则，很可能导致检测结果不准确。

结果解读错误：目前批准的检测产品都是根据新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b、包膜蛋白和核衣壳蛋白进行选择。但不同产品的检测引物、探针设计存在不同，有单靶区段、双靶区段、三靶区段的检测和判读差别。因此，如果没有严格按照不同的说明书进行判读，有可能导致结果判断错误。

联合探针锚定聚合测序法

这种检测主要是用专门的仪器检测测序载片上DNA 纳米球携带的基因序列。

这种检测的灵敏度高，不容易漏诊，但结果也容易受多种因素的影响而不准，包括：

未及时检测样本：和荧光PCR法一样，如果没有规范保存和尽快检测，结果可能不准。

检测场所的室温过高：这也会影响检测结果的准确性。

不同的检测仪器、试剂盒也可能对结果造成影响。

恒温扩增芯片法

基因芯片检测是传统的病毒学诊断方法之一，检测原理是基于核酸之间的互补结合特性开发的一种检测方式，能够用于定性或定量测量存在于生物体内的核酸。和PCR相比，基因芯片准确率高，时间更短，但价格也更为昂贵、检测通量（单位时间内所能产生的数据量）相对更低。

此次获批的这个恒温芯片，能对新冠病毒在内的6种呼吸道病毒进行检测。1.5小时内便可获得结果，

和PCR相比，基因芯片准确率高，时间更短，但价格也更为昂贵、且检测通量（单位时间内所能产生的数据量）相对更低。

病毒抗体检测

抗体检测试剂是检测血清中由病毒进入人体后刺激人体产生的IgM或IgG抗体，IgM抗体出现较早，IgG抗体出现较晚。

目前已获批的5个新冠病毒抗体检测试剂，分别采用的是胶体金法和磁微粒化学发光法。

胶体金法

胶体金法是用胶体金试纸进行检测，也就是目前常说的快速检测试纸。

这种试纸经过特殊标记，上面有孔，用于滴入受检者的血清样本。胶体金试纸上面有2条线，一条叫做检测线，另一条叫做质量控制线，如果两条线都显色，代表阳性；只有质控线显色，代表阴性；这两种情况之外都属于无效结果。

这种检查一般在10~15分钟左右，就可以得出检结果。

这种检测方法很方便，出结果的速度也很快。但主要的不足在于，检测通量较低，有一定的误判率（主要是受抗体质量影响）。

而且，胶体金法检测的新冠病毒抗体是IgM抗体。IgM产生的时间要晚于病毒复制的时间，所以检测的时间窗口比核酸检测窄。

磁微粒化学发光法

化学发光法是一种高度敏感的免疫检测，凡具有抗原性的物质都可以用这种方法测定。

磁微粒化学发光法是在化学发光检测的基础上，加用了磁性纳米粒子，使检测具有了更高的灵敏度和更快的检测速度。

不过，磁微粒化学发光法选择性差，会对一个系列的化合物做出反应，而非特定的某一化合物，因此，准确性上相对不够好。而且，环境对检测的影响比较大，容易导致误差。

新冠核酸检测 vs 抗体检测，怎么选？

目前，指南推荐能用来确诊新冠病毒感染的仍然只有核酸检测。

对于新冠病毒核酸检测阴性的疑似病例，可以采用抗体检测作为补充检测指标。对于新冠病毒核酸检测的疑似病例，也可以用抗体检测来协同使用。

此外，抗体检测还可以发挥安全评估和疗效监测作用。例如，抗体检测可作为恢复期患者血浆治疗的监测评价，也可以用在疫苗研发和效价测定中。