产品描述

Butyl-S Seplife FF层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质，它是将硫丁基键合在6%琼脂糖凝胶上，利用疏水相互作用实现目标产物的纯化分离，非特异性吸附低，可以在较低的盐浓度结合和洗脱相对较强的疏水分子，常用于重组乙肝疫苗的纯化。

产品属性参数

产品牌号	Butyl-S Seplife FF
外观	白色球状凝胶
基质	Seplife 6FF
配基	硫丁基
形状	球形
耐压流速（cm/h）＊	250-400 cm/h（在0.1Mpa）
粒径（μm）	45～165
蛋白吸附量	﹥26mg（HSA）/ml
工作温度	4～40℃
pH稳定性	3~13（长期），2~14（短期在位清洗[CIP]）
化学稳定性	在以下液体中稳定：所有常用的水相缓冲液， 1mol/L 氢氧化钠；70%乙醇；50%乙二醇；8M尿素；6mol/L盐酸胍；1mM HCl
耐热性	121℃，0.1M NaCl溶液30min
应用	乙肝疫苗纯化分离

＊检测条件：层析柱16mm×300mm；＊柱床高15cm；温度25℃；流动相为0.1mol/L NaCl。

说明书

使用方法

3.1 装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度，凝胶装柱前需要脱气。

3.2平衡

使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子，直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液，如0.02~0.05mol/L的PBS中加1~2.5mol/L（NH4）2SO4等。

3.3上样

（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤以后上样。

（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产物。

（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或样品组分疏水性强，介质对组分吸附牢。

3.4洗脱

采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱，最常用的是低盐浓度缓冲液，如0.02~0.05 mol/L的PBS。

3.5 再生

一般先用低盐浓度的缓冲溶液洗10倍以上的柱床体积，然后用结合蛋白的平衡液洗到平衡即可。若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉，可用在位清洗除去。

3.6在位清洗

（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可用0.5~1倍柱床体积的2M NaCl去除。

（2）对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类，可以先用1倍柱床体积的0.1M NaOH冲洗，再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。

（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。

3.7存储

Butyl-S Seplife FF密封保存在4~30℃（保存溶液为20%乙醇+0.1M醋酸钠溶液）干燥、通风、清洁处，不可冷冻；用过的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。

注意事项

（1）采用1/5层析柱的总结合载量，可在梯度洗脱时得到优化的分离。

（2）样品与Butyl-S Seplife FF必须用洗脱缓冲液彻底平衡后，才能进行柱层析。 

（3）在疏水层析中，疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大，以下因素的影响也不可忽视：样品溶解度、纯化规模等。

（4）所装的柱床必须表面平整，无沟流及气泡，否则应重装。

（5）若是大规模纯化和捕获蛋白，采用非连续（间隔式）浓度变化洗脱，可以减少分离时间和缓冲液用量。

（6）洗脱过程中应严格控制流速，且勿过快。

（7）加样及整个洗脱过程中，严防柱面变干。

订货信息

 

产品牌号	货号	包装规格
Butyl-S Seplife FF	A3043102	25ml
	A3043103	100ml
	A3043104	500ml
	A3043105	1L
	A3043106	5L
	A3043107	10L