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流式细胞术/FCM
  • YMFX-033
  • 北京亿鸣复兴实验类技术服务
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  • 2022-11-30 17:47:05

北京亿鸣复兴生物科技有限公司

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★实验描述:
流式细胞术(flow cytometry, FCM)是单克隆抗体、免疫细胞化学技术、荧光标记、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。工作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池,被激光器发出的激光激发荧光素发射出荧光,由荧光探测器捕获该荧光信号,这些荧光信号再经过光电转换器(光电二极管和光电倍增管)转换成电信号,经计算机处理后形成相应的图像进行数据分析。
流式细胞术可以对细胞或亚细胞结构或相关微粒(微球)进行快速定性分析、定量分析和分离选择。其特点是:
①测量速度快,最快可在1秒内计测数万个细胞;
②可进行多参数测量,可以对同一个细胞或微粒做有关物理、化学特性的近100种参数测量,并具有明显的统计学意义;
③既可以研究蛋白质,又可以研究基因;
④既是分析技术,又是精确的分选技术。
用于流式细胞术的样本是单细胞悬液,可以是血液、悬浮细胞培养液、各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液、人造微粒(微球)以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。
★服务内容:
数据处理展示:
常见问题
1、所用试剂品牌问题?
 答:一般情况下公司会根据客户的预算和要求选择相应的试剂,但是对于一些实验公司会建议客户选已经验证过的效果好的试剂,以减少实验失败的风险。主要试剂品牌有BD、BECKMAN、EBIOSCIENCS、BIOLEGEND、QUANTOBIO等品牌。
2、流式成熟的实验方案?
 答:T/B/NK细胞的分析与分选、细胞凋亡、DNA倍体、干细胞分析与分行、细胞外因子检测、细胞内因子检测、染色体分选、FLOW-FISH、免疫药理/毒理评价、血小板研究。
3、所用仪器型号?
 答:公司所有的仪器主要是BD公司的仪器,如Calibur、Aria、Canto等仪器,可做四色、六色、八色,根据实验自由选择。
4、一般实验过程?
 答:确定实验目的-选择实验方法(流式方案)-分析样本处理-确认所用仪器(主要是激光器波长及检测器波长)-查找所用标记(配色)-查找相应抗体及同型对照-再次确认实验方案-确认报价及成交价格-预实验验证结果-正式实验-分析结果-完成实验目的-反思实验过程总结经验与教训。
5、常用激光器及荧光素?
 答:比较常见的激光器一般是488nm和633nm两根,常见荧光素是FITC/PerCP/PE/PE-CY5/APC/APC-CY7这六种荧光标记的抗体,具体用时还要看仪器和抗体标记情况(有没有相应的标记抗体往往成为限制实验的瓶颈)。
6、同型对照?
 答:流式同型对照的目的主要是为了减少非特异性结合,确认是相应的抗原决定簇与抗体之间的反应,保证结果特异性的真实有效性,但是这仅仅是一种方式,还有别的方法来减少非特异性结合。
强烈建议客户在设计实验前与公司技术人员联系,以获得免费的实验建议,减少不必要的后期方案修改和降低无效结果的风险;
公司可以提供完整的实验方案,客户只需要按要求提供样本就可以得到实验报告,公司可以为客户论文发表提供一些必要支持,但是公司不会替客户发表论文;
对于自己设计好的方案和已经购买相关试剂的检测服务,无论是否得到预期的实验结果都收取相应的检测服务费用,公司可以协助分析数据,但不会负责产生问题的原因。
客户的样本要按合同的要求提供,否则公司不保证结果的可靠性;
公司如果有相应抗体,可以为少量样本的客户提供相关抗体,减少客户购买过多的抗体浪费研究经费。
★服务价格:
我们会根据客户实验所有试剂品牌、样本量、实验复杂程度、样本处理复杂程度、客户结果要求难易程度、合同额度大小、结账周期等因素考虑报价,所以具体信息请与公司联系,在确定必要信息后再报价格。
★服务周期:
根据具体实验而定。

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