GST pull-down 实验/pull-down
- YMFX-020
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- 2022-11-30 17:46:27
北京亿鸣复兴生物科技有限公司
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★服务描述：
GST pull-down 实验是一个有效验证酵母双杂交系统的体外试验技术。
基本原理：将靶蛋白-GST 融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当一种“诱饵蛋白”，目的蛋白溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白)，洗脱结合物通过 SDS-PAGE 电泳分离，最后经 western blot 或质谱分析，从而证实两种蛋白间的相互作用；
“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。
★服务应用：
GST pull-down 非生理状态下验证两种目标蛋白质是否直接互作
★服务路线：
GST pull-down 实验是一个有效验证酵母双杂交系统的体外试验技术。
基本原理：将靶蛋白-GST 融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当一种“诱饵蛋白”，目的蛋白溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白)，洗脱结合物通过 SDS-PAGE 电泳分离，最后经 western blot 或质谱分析，从而证实两种蛋白间的相互作用；
“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。
★服务应用：
GST pull-down 非生理状态下验证两种目标蛋白质是否直接互作
★服务路线：
★服务内容：
① GST 融合蛋白表达载体构建；
② His 标签融合蛋白表达；
③ GST 融合蛋白表达及纯化；
④ GST、His 标签融合蛋白表达总细菌裂解液制备；
⑤ GST pull down；
⑥ 蛋白样品 95℃、10min 变性，SDS-PAGE 电泳分离；
⑦ 考马斯亮蓝染色；
⑧ Western blot；
★样本要求：
① 互作蛋白名称、Gene ID、物种信息；
② 诱饵蛋白及捕获蛋白表达载体；
③ Western blot 检测一抗（可以由乙方代购）；
★服务承诺：
① GST pull down PAGE 电泳电子图片；
② 相互作用蛋白鉴定结果：western blot 原始图片及鉴定结果；
★其他服务项目：
① GST 融合蛋白表达载体构建；
② His 标签融合蛋白表达；
③ GST 融合蛋白表达及纯化；
④ GST、His 标签融合蛋白表达总细菌裂解液制备；
⑤ GST pull down；
⑥ 蛋白样品 95℃、10min 变性，SDS-PAGE 电泳分离；
⑦ 考马斯亮蓝染色；
⑧ Western blot；
★样本要求：
① 互作蛋白名称、Gene ID、物种信息；
② 诱饵蛋白及捕获蛋白表达载体；
③ Western blot 检测一抗（可以由乙方代购）；
★服务承诺：
① GST pull down PAGE 电泳电子图片；
② 相互作用蛋白鉴定结果：western blot 原始图片及鉴定结果；
★其他服务项目：
★项目一般流程：
