Bsu DNA 聚 合 酶 , 大 片 段 ( Bsu DNA Polymerase, Large Fragment)由克隆有来自 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 基因的重组E. coli 菌株表达并经过多步纯化精制得到。该酶保留了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 的 5´→3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域(截去了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 (Bsu) I 基因的前 296 个 AA,因而缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域),同时该大片段自身缺乏 3´→5´ 核酸外切酶活性。
产品组分
运输与保存方法
-20℃储存,有效期 1 年(避免反复冻融)。
储存缓冲液
25 mM Tris-HCl (pH 7.4), 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol and 50% glycerol.
活性定义
在 37 ℃条件下,30 min 内使 10 nmol 的 dNTP 掺入到酸性不溶物所需要的酶量定义 为 1 个活性单位(U)。
热失活
75 ℃,20 min
质量控制
核酸外切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;
核酸内切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λDNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱
带不发生变化;
切口酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg pBR322 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;
RNase 活性:50 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;
大肠杆菌 DNA 残留检测:5 U 本品中残留的 核 酸 经 E.coli 16s rDNA 特 异 性 的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝。
反应条件
1X Bsu Reaction Buffer:
10 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25°C)
50 mM NaCl
10 mM MgCl2
1 mM DTT
应用
发布需求
意向单
反馈
400-661-8020