肺癌组织芯片-免疫组化
- IWLT-N-70L43
- 双旋生物
- 湖北省武汉市
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- 2022-05-23 11:33:48
武汉双旋生物科技有限责任公司
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- 关键词
- 组织芯片,免疫组化,病理实验
一般常用免疫组化实验方案:
1、选择一抗(由老师自己查阅文献选择,可自己提供,也可由我司代购):同一名称对应有多个序列号的一抗,因为在制作时截取的核酸片段是不一样的,所以这个需要老师查阅一下文献,根据研究内容来确定的,做免疫组化的话购买时Application这里最好是有IHC-P;常用的是鼠抗或是兔抗,一般单抗比多抗要特异性方面要好一些。
2、根据我司提供的所有肺癌组织芯片信息表,选择满足实验需求的肺癌组织芯片;
3、预实验:购买抗体时说明书一般会给一个浓度范围,而且同一种一抗在不同肿瘤类型里面稀释的浓度也是有差异的,所以在正式实验之前会做3个梯度浓度+1个阴性对照的预实验,在预实验中确认一个最适浓度继续后面的正式实验,阴性对照的目的在于监控本次的实验,阴性对照就是在加一抗的这一步不加,这样特异性结合的链条就断了,最后如果阴性对照是阴性结果,即证明本次实验结果的有效性,如果阴阳对照出现阳性信号,即本次实验的实验片很大可能有非特性染色的结果;即安排重新进行实验;(注:本次使用的预实验白片由我司提供)
4、用预实验中选择的浓度在组织芯片上做免疫组化;(注:本次使用的组织芯片正式片是由本方案步骤2客户选择的满足实验需求的组织芯片)
5、实验结果之后可以做一个全景扫描,因为组织芯片点数较多,显微镜下不好确定每个点的位置,用全景扫描文件直接在电脑上看就会方便许多,后续在发表文章时截图也会方便很多;
6、实验结果分析:按照阳性强度和阳性面积对每一个点即每一个样本进行评分;
7、统计学分析:将面积和强度相加或是相乘,计算卡方,找出一个截断点,分出低表达组和高表达组,然后再计算卡方、回归或是相关性,根据自己的实验需求来做统计学分析,数据出来了就可以直接放在文章里面了。
8、收费:欢迎来电咨询,具体实验收费跟本司工作人员确认;