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流式核内染色试剂盒
  • MD-20003
  • 东岭生物
  • 上海市
  • 现货
  • 125test
  • 1485
  • 2022-08-24 14:44:49

上海乐赛生物科技有限公司

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DL-Nuclear Fix/Perm Kit主要应用于对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色,可固定细胞并透化细胞核核膜,进而对核内蛋白质进行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer经过反复优化,可减少非特异性染色并最大化特异性荧光信号强度。

产品特点
►针对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色
►特异性强,荧光信号强度高

产品成分

产品名称

Cat log #

规格

储存条件

流式核内染色试剂盒

MD-20003

1 kit

4℃

Fix/Perm Concentrate (2X)

MD-20003-FP

50ml

Fix/Perm Diluent

50ml

N-Perm/Wash Buffer (10X)

MD-20003-PW

50ml


试剂配制
1.Fix/Perm工作液(1X):将1体积Fix/Perm Concentrate (2X)加入1体积的Fix/Perm Diluent,如将1ml Fix/Perm Concentrate (2X) 加入1ml的Fix/Perm Diluent,配制成2ml的Fix/Perm工作液,使用前新鲜配制。
2. N-Perm/Wash Buffer工作液(1X):将1体积N-Perm/Wash Buffer (10X)加入9体积的去离子水,如将1ml N-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去离子水,配制成10ml的1X N-Perm/Wash Buffer,1X N-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周内使用。

使用说明
(请详细阅读使用说明后再开始相关实验)
  1.表面染色(可选):收集细胞后,每管加入50ul表面染色缓冲液和适量体积的表面抗体,充分重悬细胞,4℃,避光孵育30 min后,加入500 ul表面染色缓冲液,300g×5min,4℃离心,弃去上清液;
  2.使用涡旋振荡仪震荡细胞沉淀,使其松散。
  3.向每管细胞中加入500ul Fix/Perm工作液,充分重悬细胞,2-8°C避光孵育30分钟;   
注:建议细胞密度不高于10^7/ml。
  4.向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液;
  5.600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;
  6.每管加入100ul 1X N-Perm/Wash Buffer工作液和适量体积的胞内抗体,充分重悬细胞;
  7.2-8°C避光孵育1h以上或过夜;
  8.向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液,洗去未结合抗体,600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;
  9.重复洗涤一次。
  10.将细胞重悬于300-500ul N-Perm/Wash Buffer工作液进行上机分析。
注:在室温下保存时,样品应在2小时内进行上机分析;在2-8℃下保存时,应在24小时内分析样品。

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