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实时荧光定量PCR/QPCR

货号 YMFX-010
品牌 北京亿鸣复兴实验类技术服务
发货地 北京市
交期 一个月内
规格 按需定制
参考价格 议价 
更新时间 2022-11-30 17:47:34

北京亿鸣复兴生物科技有限公司

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关键词
实时荧光定量PCR实时荧光定量QPCR

★实验描述：
实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR(real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。目前实时定量PCR作为一个极有效的实验方法，已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。
Real-TimePCR常用的两种方法为:SYBRGREEN（荧光染料掺入法）和Taqman probe（探针法）。

1. SYBR green 法

在PCR反应体系中，加入SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

1. Taqman Probe 法

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一段寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时，Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步
★服务内容：

1. 根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针;
2. 提取样品的RNA/DNA，并反转录成cDNA
3. Real-Time PCR，进行实验结果分析;
4. 提供完整的实验报告。

★服务流程：

1. 样本收集
2. RNA 提取
3. RNA 反转录为 cDNA
4. 预实验
5. QPCR 检测
6. QPCR 熔解曲线检测
7. 数据分析

★数据处理展示：

★常见问题
1、样本如何取材?
进行QPCR检测的样本，需要在取材后立即置于液氮中速冻(取材样本可以保存在冻存
管或EP管中)。速冻后的样本置于-80冰箱中的保存。
2、样本如何运输?
样本运输需要采用干冰运输。根据运输时间的不同，采用不同数量(重量)的干冰。如
运输需2-3天时间，建议采用10公斤干冰保温运输。请勿将样本置于干冰表面或底部，
干冰需要覆盖所有样本。
3、是否可以提供RNA进行检测?
可以。RNA保存和运输条件请参见样本的保存和运输。
直接提供RNA样本，如由于保存和运输原因造成降解，公司不承担相应责任。
4、进行OPCR检测，我们还需提供什么信息?
您除了提供样本(请明确样本物种，如人，小鼠，拟南芥等)外，只需再提供待检测的
基因信息，包含基因名称、基因登录号等能够明确具体基因信息即可。
★服务说明：
1.提供新鲜且足量的样本材料，或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样品)。
2提供已知的全长基因序列，Gene ID，详细背景资料，DNA/RNA来源、丰度等。
★服务周期：
小于15个样本(包括RNA提取，反转录，引物验证，检测完成)，15个工作日。大
于15个样本，根据具体情况而定。
★服务承诺：

1. 本公司会在最短的时间内快速将实验完成；

2. 本公司会为您提供详细的报告,报告提供的内容完全可以满足你论文或是写文章的需要；

3. 本公司保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。

★其他服务项目：

★项目一般流程：