产品描述

Phenyl Seplife FF（LS）层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型疏水层析介质，是将苯基偶联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上形成的强疏水性疏水层析分离介质，利用生物分子表面的疏水基团与层析介质上的疏水基团相互作用强弱不同进行分离，广泛应用于单抗的疏水层析纯化。

产品属性参数

产品牌号	Phenyl Seplife FF（LS）
外观	白色球状凝胶，无臭无味
基质	Seplife 6FF
配基	苯基
形状	球形
最高流速（cm/h）＊	600
耐压（MPa）	0.3
粒径（μm）	45～165
工作温度	4～40℃
配基密度	25μmol苯基/ml介质
蛋白质吸附容量	33mg HSA/ml介质
pH稳定性	3~13（长期），2~14（短期在位清洗[CIP]）
化学稳定性	1mol/L 氢氧化钠；70%乙醇；30%异丙醇； 0.5% SDS；10%乙二醇；6mol/L盐酸胍；8mol/L尿素；3mol/L（NH4）2SO4
应用	单抗的疏水层析纯化

＊检测条件：层析柱16mm×300mm；＊柱床高15cm；温度25℃；流动相为0.1mol/L NaCl。

说明书

使用方法

3.1 装柱

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度，凝胶装柱前需要脱气。

3.2平衡

使用2~5倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子，直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。

3.3上样

（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤以后上样。

（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产物。

（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或样品组分疏水性强，介质对组分吸附牢。

3.4洗脱

采用降低盐浓度使吸附的生物分子被洗脱下来。添加表面活性剂或者有机溶剂可加强洗脱，最常用的是低盐浓度缓冲液，如0.02~0.05 mol/L的PBS。

3.5 再生

（1）先用蒸馏水按操作流速冲洗3～5个柱床体积，然后用平衡液清洗3～5个柱床体积。

（2）再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉，可用在位清洗法除去。

3.6在位清洗

（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可用0.5~1倍柱床体积的2M NaCl去除。

（2）对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类，可以先用1倍柱床体积的0.1M NaOH冲洗，再用平衡缓冲溶液清洗直至pH呈中性。

（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱床体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。

3.7存储

Phenyl Seplife FF（LS）密封保存在4~30℃（保存溶液为20%乙醇）干燥、通风、清洁处，不可冷冻；用过的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。

3.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。

注意事项

（1）典型的配基和蛋白质结合强度由强到弱的顺序是：苯基（phenyl）、辛基（octyl）、丁基（butyl）、异丙基（isopropyl）、醚（ether）。如果样品和介质结合紧密，可更换为弱介质更容易洗脱下来。

（2）在疏水层析中，疏水介质和疏水配基对选择性影响非常大，以下因素的影响也不可忽视：样品溶解度、纯化规模、所需规模的正确配基。

（3）由于强疏水蛋白质和疏水配基结合非常紧密，因此在筛选疏水介质时，如果样品是强疏水蛋白质，可从低疏水性介质开始，选择在低盐浓度下得到最高分辨率和载量的介质。

（4）样品与Phenyl Seplife FF（LS）（低载量）必须用洗脱缓冲液彻底平衡后，才能进行柱层析。 

（5）采用1/5层析柱的总结合载量，可在梯度洗脱时得到优化的分离。

（6）所装的柱床必须表面平整，无沟流及气泡，否则应重装。

（7）若是大规模纯化和捕获蛋白，采用非连续（间隔式）浓度变化洗脱，可以减少分离时间和缓冲液用量。

（8）洗脱过程中应严格控制流速，且勿过快。

（9）加样及整个洗脱过程中，严防柱面变干。

订货信息

产品名称	货号	包装规格
Phenyl Seplife FF（LS）	A3013202	25ml
	A3013203	100ml
	A3013204	500ml
	A3013205	1L
	A3013206	5L
	A3013207	10L