DIFF新冠假病毒在抗原性质和免疫原性分析中具有很强的效力，可用来检测各种血清中和抗体。中和抗体检测对于临床前以及临床试验和大规模接种后疫苗效果的评估至关重要。利用天然病毒进行中和抗体检测成本高，危险性大，检测困难。

DIFF新冠假病毒内含有GFP及Luciferase报告基因，方便检测。 当使用DIFF新冠假病毒感染细胞或实验动物时，DIFF新冠假病毒会借助病毒囊膜表面的S蛋白与细胞膜上的ACE2蛋白相作用，进一步感染宿主细胞并复制，报告基因eGFP或Luciferase随即表达，其表达量与被感染的假病毒数量成正比，如果假病毒在细胞感染前与含有中和抗体的样品共同孵育，将阻止病毒进入细胞过程。故可以通过显微镜下绿色荧光蛋白强度或化学发光强度的结果来反映样品中和抗体的水平，绿色荧光蛋白强度或化学发光强度与中和抗体浓度成反比。

报告基因eGFP为增强型绿色荧光蛋白，检测灵敏度高，荧光强度强、荧光性质稳定，便于后续观察与检测，适合检测少量样品。Luciferase是一种荧光素酶报告基因，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达，定量结果读取更直观，适用于的高通量筛选。

图1 DIFF新冠假病毒(eGFP系统)免疫血清中和实验

表1 疫苗效果评价-DIFF新冠假病毒（Luc系统）免疫血清中和抗体检测

图注：DIFF疫苗免疫后，分别利用DIFF新冠假病毒eGFP和Luciferase系统检测免疫后不同天数中和抗体水平，动态监测中和抗体水平变化，评估疫苗的免疫持续期。