Frdbio HRP快速标记试剂盒

 

产品货号：ARL0010K                                          

主要组分：          

辣根过氧化酶(HRP ，Activated) (10mg/mL)                  0.5mg/1mg/5mg

标记缓冲液(Labeling Buffer)                          5.0mL/15mL/30mL*2

标记终止液干粉(Stop Buffer Powder)                    2.5mg/2.5mg*2/2.5mg*5

标记物保存液(Labeled Product Buffer)                 2.0mL/2mL*2/10mL

 

适用范围：

本试剂盒适用于带有游离氨基的物质的标记，比如：带有游离氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗体。

 

产品简介：

本试剂盒原理：采用改良的碘氧化法活化辣根过氧化物酶（HRP），经过氧化以后活化的HRP可以与待标记物的游离氨基结合，发生希夫碱反应（Schiff's base reaction）。本试剂盒适用于带有游离氨基的物质的标记，比如：带有游离氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗体。

 

储存条件：

该试剂盒在低温下运输，收到后请置于2-8℃保存，保存时间3个月。

 

注意事项：

此时准备待标记物：待标记物以0.01M pH7.4 PBS环境为佳，不应含有甘油、叠氮钠、氨基物质（包括甘氨酸、Tris 等），EDTA等物质。如果含有以上物质，需用0.01M pH7.4 PBS 缓冲溶液进行充分透析或者超滤管超滤以除去以上物质保证标记效率；调整待标记物的浓度至适当的浓度，抗体调整的浓度为2mg/mL左右；对于小分子物质需要实验者摸索浓度，保证HRP的比例过量，如果不能确保HRP过量的话，标记完之后最好透析或者过滤除去未标记的小分子物质。

 

产品使用方法：

1.  标记前准备：

从4℃取出HRP标记试剂盒，室温条件下平衡30分钟，使各组分充分解冻后混匀。

 

2.标记反应：

向待标物的溶液中加入1/10体积的标记缓冲液，用移液枪反复吹打几次以充分混匀，避免产生气泡；取等量辣根过氧化酶到待标记物中，用移液枪反复吹打几次以充分混匀，避免产生气泡，室温避光反应2小时左右。

 

3.标记反应终止：

将反应终止液干粉管中加入1mL去离子水配成反应终止液[2.5mg/ml]，取适量的反应终止液加入步骤2的反应液中，比例为：每10μL反应液加入1μL反应终止液。充分混匀，室温放置1 小时。

 

4.标记物产物收集与保存：

终止完成后，加入等体积的标记物保存液，充分混匀，置于-20℃保存。

 

附表：抗体标记用量参考表（本表仅做参考）

产品编号	HRP酶量	可标记抗体量	最佳反应体积
ARL0010K-500	500 μg	500 - 2000 μg	500 μl
ARL0010K-1000	1000 μg	1000 - 4000 μg	1000 μl
ARL0010K-5000	5000 μg	5000 - 20000 μg	5000 μl
标记比例：（抗体:HRP标记质量比为 1：1；抗原:HRP质量比为1：4左右）；

声明：本表只做参考，具体还是需要实验人员根据实际情况摸索条件。

*本试剂仅供实验室研究使用