Cat. No. VL3514


载体特性
类型：慢病毒基因过表达载体
基因启动子：EF1a IE promoter
报告基因：mKate2，Firefly luciferase
真核细胞筛选抗性：Puromycin
原核抗性：Ampicillin

      pLV- mKate2-luci(EF1a)载体是基于HIV1的慢病毒基因过载体。载体高效表达红色荧光蛋白mKate2和萤火虫荧光素酶基因，可以用于活体动物荧光成像及化学发光成像。EF1a 启动子来自人类靶向延长因子 1α（EF1A）基因，可在多数种类细胞中稳定表达，尤其是干细胞等CMV 启动子会发生沉默的细胞,同时PGK启动子驱动表达Puromycin抗性基因。利用本载体包装的慢病毒将表达Puromycin抗性基因，可以方便地使用Puromycin筛选出稳定细胞系。

     pLV-mKate2-luci(EF1a)载体包含了生产慢病毒所必须的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表达效率的原件。载体结构紧凑，病毒包装效率高。

用法说明
    pLV-mKate2-luci(EF1a)载体与包装载体共转染HEK293T细胞后（包装体系货号KLV3501和KLV3502），产生高滴度复制缺陷的慢病毒颗粒，可以直接用于感染细胞或者纯化浓缩后感染细胞。

测序引物：
正向引物EF‐F：ATTCTCCTTGGAATTTGCCCT
反向引物PGK-R：GGTGGATGTGGAATGTGTGCGA

原核培养特性
    pLV-mKate2-luci(EF1a)载体为高拷贝质粒，带有氨苄抗性基因，可以在含有100 μg/ml氨苄抗生素的LB培养基中增殖。宿主菌可以采用DH5α，JM109，TOP10等常见大肠杆菌菌种。

注意：
本载体中的部分序列来自已公布数据库，本公司没有对该载体完全测序。