适用于所有基于LightCycler的仪器专用的PCR反应热启动预混液，内含快速启动DNA聚合酶，常温失活，高温热启动。LightCycler® HybProbe基于荧光共振能量转移的原理，除了PCR引物外，还将用不同染料（供体和受体）标记的两种序列特异性寡核苷酸探针添加到反应混合物中。HybProbe探针在退火阶段以头对尾排列方式与扩增的 DNA 片段上的靶序列杂交，从而使两种染料非常接近。供体染料（荧光素）被蓝光 LED光源激发，供体染料发射的能量激发附着在第二个HybProbe探针上的受体染料，然后发射不同波长的荧光。荧光量与PCR过程中产生的目标DNA量成正比。