小鼠检测试剂盒的样品稀释和试剂准备方法
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小鼠检测试剂盒的样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠CD48呈正相关。
小鼠检测试剂盒的样品稀释：
用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同，分别采取不同的稀释方案，以下方案仅供参考，样品的稀释应有详细记录。
高：指待测因子在40～400ng/ml。一般按1:100稀释。297μL样品稀释液加3μL样品。
中：指待测因子在4～40ng/ml。一般按1:10稀释。225μL样品稀释液加25μL样品。
低：指待测因子在62.5～4000pg/ml。按1:2稀释。100μL样品稀释液加100μL样品。
特低：指待测因子≤62.5pg/ml。样品一般不做稀释，或按1:2稀释。
小鼠检测试剂盒的试剂准备：
小鼠标准品的稀释和使用：在使用前2小时内准备。试剂盒提供2管标准品，每管10ng，每次使用1管。
配制10,000pg/ml标准品：取1mL样品稀释液加入标准品管内，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解。
配制4000pg/ml标准品：取0.4mL10,000pg/ml的标准品加入有0.6mL样品稀释液的Eppendorf管中，混匀，做上标记。
配制2000pg/ml～62.5pg/ml标准品：准备6只Eppendorf管，每管加0.3mL样品稀释液，分别标记上2000pg/m，1000pg/ml,500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml。取0.3mL4000pg/ml的标准品加入标记2000pg/ml的管中，混匀后同样取出0.3mL，加入下一只管中。余同此类推，直到最后一只样品管。
注意：已经稀释的标准品(10,000pg/ml)，应在12小时内使用。-20℃冷冻保存条件下，2天内可以使用，但不得反复冻融。
生物素标记抗小鼠CD48抗体工作液：在使用前2小时内准备。
根据每孔需要100μL计算总的用量(实际配制时应多配制100～200μL)。
按1μL生物素标记抗小鼠CD48加抗体稀释液99μL的比例配制工作液。轻轻混匀。
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)工作液的准备：在使用前1小时内准备。
根据每孔需要100μL计算总的用量(实配时应多配制100～200μL)。
按1μL亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)加ABC稀释液99μL的比例配制工作液。轻轻混匀。
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