血清在培养过程中出现“小黑点”是怎么回事
牛血清在培养基中扮演着这么多的角色,那么它在培养的过程中也会出现一些的问题,比如说:在培养过程中会出现一个个“小黑点”的现象,这是怎么一回事呢?
血清在培养过程中出现“小黑点”是怎么回事?
牛血清在培养基中扮演着这么多的角色,那么它在培养的过程中也会出现一些的问题,比如说:在培养过程中会出现一个个“小黑点”的现象,这是怎么一回事呢?
我们一旦发现培养基中有黑点,我们先不要着急,也不要惊慌,要搞清楚这个黑点是什么?什么形成的?
首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动等。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
首先可能是细胞生长过老,破碎的细胞残骸;再有可能就是血清质量不好,反复冻融的结果;然后可能是配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;其次可能是亦有可能是配制培养基的水质、容器不合格(可应用离心、过滤的方法去除这些黑点);最后可能是培养的原代细胞中出现小黑点(可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除)。
那么我们如何防止黑点生成呢?通过我们多年的从业经验,我们公司认为至少要做到以下几点:
(1)尽可能地减少血清冻融次数;
(2)培养基无需37℃水浴;
(3)培养基保持最佳PH值7.0- 7.2;
(4)严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗;
(5)掌握细胞传代的最佳时机,细胞切勿生长过老。
咨询
- 275
- 点赞
- 复制链接
- 举报