质粒与siRNA转染试剂的选择

质粒转染试剂是质粒转染能否成功的关键。目前，最为知名和权威的质粒转染试剂无疑是国际巨头赛默飞的Lipofectamine3000，但此君好用，身价不菲。一支1.5ml的Lipofectamine3000，官网售价高达8010元，实在让人不易亲近。百代生物荟萃了一群海归博士，大家顶着博士的学衔，总想着要干点什么。于是，锚定Lipofectamine3000的性能，经过几年努力，交出了一份还算满意的答卷，研发出了RFect系列质粒转染试剂。考虑到科研同仁的不同需求，我们的转染试剂中有专门高效转染质粒的试剂，也有既能高效转染质粒DNA也能高效转染siRNA的试剂；既有高效转染贴壁细胞的质粒转染试剂，也有高效转染原代细胞和悬浮细胞的转染试剂，现向诸君具体介绍如下：

一、质粒DNA转染试剂:  RFect系列质粒DNA转染试剂

RFect系列质粒DNA转染试剂专门用于质粒DNA的转染，具有非常卓越的转染性能，可高效转染绝大多数贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞。其中，RFect质粒DNA转染试剂主要用于贴壁细胞的质粒转染，转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上，完全媲美Lipofectamine3000的质粒转染效率。RFect悬浮细胞质粒DNA转染试剂主要应用于悬浮细胞的质粒DNA转染，在293F中，转染阳性率可高达85%以上，在CHO-S中，转染效率可达50%以上，显著优于绝大多数同类试剂。特别地，RFect悬浮细胞质粒DNA转染试剂的细胞毒性很低，转染后24小时细胞死亡率不到10%。因而，随着培养表达时间的延长，目标蛋白的表达量将会显著增长，远远优于那些毒性较大的转染试剂。对于原代细胞，考虑到其细胞膜比较敏感，内吞作用不够明显等因素，我们采用了更加温和、低毒的组方----RFect原代细胞质粒DNA转染试剂。在原代肝癌细胞中，其质粒DNA转染效率可达80%以上，而细胞未见明显死亡。RFect系列质粒转染试剂的使用都非常方便，不需要使用特殊的低血清培养基，不需要额外增加培养基成本，也不需要苦苦等待培养4-6小时后换液，只需使用普通的血清培养基就可以了。

表1  RFect系列质粒转染试剂

二、质粒DNA和siRNA均可高效转染:  RFect Prime核酸转染试剂

RFect Prime系列核酸转染试剂盒是在RFect质粒DNA转染试剂盒的基础上进一步研发成功的可用于各类核酸高效转染的试剂盒。RFect Prime功能强大，不仅可高效转染较大分子的质粒DNA，还可高效转染mRNA、siRNA、mimics、反义核酸和各种小分子DNA，转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上。目前，国际上具有如此强大核酸转染功能的转染试剂主要为Lipofectamine3000，这也是其售价如此之高的根本原因。我们经过长期研究，反复实验，研发出的RFect Prime系列核酸转染试剂的性能可完全媲美与Lipofectamine3000。特别地，我们有专门的原代细胞核酸转染试剂和悬浮细胞核酸转染试剂，对原代细胞和悬浮细胞的核酸转染性能显著优于国际同类产品。RFect Prime的转染性能非常专业化，针对部分客户需要将2种以上核酸如质粒DNA和siRNA同时转染入同一细胞，我们研发了RFect ^CO Prime核酸共转染试剂，可完美地将质粒DNA或mRNA与siRNA或反义核酸或小分子DNA转染入同一细胞。在大多数贴壁细胞中，RFect ^CO Prime的质粒转染阳性率可高达90%以上，而在质粒转染阳性的细胞中，95%以上的细胞均可共转染siRNA或反义RNA。RFect Prime系列核酸转染试剂盒的价格具有非常的亲和力，拥有如此强大的转染性能，价格还不到Lipofectamine3000的50%，是绝大多数核酸转染专家的理想选择。

表2 RFect  Prime系列核酸转染试剂

三、普通质粒DNA转染试剂:  Lipofect5000质粒DNA转染试剂

Lipofect5000是一款通用型入门质粒转染试剂，适用于对质粒转染要求不高的研究者，或者研究经费比较紧张的研究者。Lipofect5000可转染绝大多数贴壁细胞和部分悬浮细胞。在贴壁细胞中，Lipofect5000质粒DNA的转染阳性率在60%-70%之间，对于血管内皮细胞，Lipofect5000具有更加优异的转染性能，转染阳性率可高达85%以上。对于普通的质粒转染实验，这样的转染效率已经足够。特别需要指出的是，Lipofect5000的价格非常便宜，0.5mL的定价只有490元，在同类性能的转染试剂中，Lipofect5000的价格属最为优惠的之一。如果您刚刚开始质粒转染实验，或对质粒转染要求不是很高，或者经费比较紧张，Lipofect5000显然是您比较理想的选择。

       图A  Rfect Prime 转染EGFP质粒于Hela细胞，48h      图B Rfect Prime 转染 Cy3-siRNA于Hela细胞，24h