▎  用途

 

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中  TNF-β 浓度。

 

▎  检测原理

 

 

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

 

反应类型	双抗夹心法
规格	96T/48T
中文名称	大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒
反应时间	1.5 h
检测方法	酶联免疫吸附测定
检测范围	7.5 pg/mL – 240 pg/mL
灵敏度	1.0 pg/mL
上样体积	50 μL/孔
样本类型	血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本

 

▎  特异性

 

可检测样本中的 TNF-β   , 且与其它类似物无明显交叉反应。

 

▎  重复性

 

板内，板间变异系数均<10%。

 

▎  标曲图

▎  批内差

 

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

 

▎  批间差

 

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

 

▎  精密度

 

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

 

▎  稳定性

 

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

 

 

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

 

 

英文名称	中文名称	规格	规格
Microe isa stripplate	包被微孔板	96T	48T
Standard	标准品	0.3ml/管*6	0.3ml/管*6
HRP-Corjugate	HRP标记抗体	10mL	5mL
Sample Diluent	样本稀释液	6mL	3mL
Chromogen SolutionA	底物液A	6mL	3mL
Chromogen SolutionB	底物液B	6mL	3mL
Stop Solution	终止液	6mL	3mL
20× Wash Solution	20×浓缩洗涤液	25mL	15mL
Product Description	说明书	1份	1份
Sealing film	封板膜	2张	2张

 

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.