脂多糖（LPS）提取试剂盒
产品货号：26127
产品规格：50T/100T
产品简介：
脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高（在250℃下干热灭菌2h
才完全灭活）。受LPS发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素（endotoxin）。LPS由多糖链和脂质A
组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起
免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床
常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
由于LPS与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，
免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如
炎症反应，急性肺损伤。
LPS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖，提取产量高，省时，蛋白质和核酸污染低。
自备材料:
1. 仪器准备：离心机、振荡器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒。
2. 试剂准备：PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒。
3. 耗材准备：离心管、吸头、一次性手套。
产品组成：
试剂名称 50T 100T 保存条件
组份A：试剂A 50ml 100ml 2-8℃
组份B：提取液B 25ml 50ml 2-8℃
组份C：提取液C 25ml 50ml 2-8℃
产品应用：WB，IP等。
产品特点：
1. 适用性广，能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。
2. 操作简单方便。
3. 提取LPS下游应用广，包括直接用于免疫刺激。
使用方法：
1. 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞
2. 加入500μl试剂A重悬细菌，8000×g离心3分钟，弃上清。
3. 收集沉淀，加入500μl试剂A重悬沉淀，8000×g离心3分钟，弃上清。
4. 收集沉淀，加入500μl提取液B重悬沉淀。
5. 在150-300w超声10秒间隔10秒，超声5-15分钟。
6. 在10000×g离心10分钟取上清。
7. 在上清中加入500μl提取液C，剧烈涡旋20秒充分混匀。
8. 在66-68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
9. 置4℃静置过夜。
10. 在4℃，3000×g离心20分钟。
11. 取最上层上清至另一干净离心管，即得脂多糖样品。
使用注意事项：
1. 离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g
显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘
米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2
（×g）。
2. 可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。
注意事项：
1. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离
心至管底部再开盖。
3. 试剂拆封后请尽快使用完。
有效期：12个月有效。