
外泌体蛋白质组学(label free)
- YZEXO-11
- 研载生物
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- 2022-07-21 16:15:07
研载生物科技(上海)有限公司
外泌体蛋白质组学(label free)
一、技术简介
外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。外泌体可携带蛋白质、脂类、核酸(miRNAs,ncRNAs)等多种生物功能大分子,通过质谱的高通量蛋白质组学研究外泌体中蛋白组成及对蛋白进行定量分析。
蛋白质非标记定量技术(Label-Free Quantification)是通过液质联用技术直接对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。Label-Free Quantification的技术优势就在于毋需对蛋白质预先使用昂贵的同位素标签进行标记,所需样品总量少,耗费低。轻松实现蛋白的相对定量,用于复杂体系中生物标志物的筛选。
二、实验流程
1. 样本准备
2. 蛋白酶解
3. nanoUHPLC-MS/MS分析
4. 数据分析
三、数据分析
1. 定性定量质控及结果
2. 鉴定及差异蛋白统计作图
3. GO功能分析
4. KEGG通路分析
5. KOG(COG)分析
6. STRING-DB蛋白相互作用网络
四、服务说明及结果
1. 客户提供:外泌体或由我司提取外泌体。
2. 公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期:40个工作日。