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大鼠NK细胞
  • IMP-R091
  • 逸漠生物
  • 福建省厦门市
  • 一个月内
  • 1mL冻存管
  • 6710
  • 2022-11-04 14:57:41

厦门逸漠生物科技有限公司

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一、细胞基本属性

细胞名称

大鼠NK细胞

种属来源

大鼠

组织来源

外周血

生长特性

贴壁生长

形态特征

圆形或椭圆形细胞,不规则细胞

质量检测

CD56和CD16免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

产品规格

5x105cells/T25或1mL冻存管

培养基

大鼠NK细胞完全培养基

培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

换液频率

每2-3天换液一次

消化液

0.25%胰蛋白酶

产品货期

4周左右

运输方式

T25培养瓶/顺丰快递(包邮)

供应限制

仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

背景介绍



自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。


自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin,LR) 对NK细胞的活化和分化有正调节作用, 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。



二、细胞培养操作

收货处理

取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态

传代密度

细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养

传代代数

可传5代左右;3代以内状态最佳,建议收到细胞后尽快进行相关实验

传代比例

首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法


1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;


2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;


3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;


4.待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。



备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考


客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。


三、注意事项

重要提醒


1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。


2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。


3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。


4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。


到货须知



1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。


2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。


3.由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。


4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。



四、售后服务

重发标准



1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;


2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;


3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;


4.常温发货的细胞静置 2 小时后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;


5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封,出现污染,经核实后,重发;


6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;


7.视具体情况而定。



不予重发



1.客户操作造成细胞污染,不重发;


2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;


3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;


4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;


5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;


6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;


7.视具体情况而定。


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