食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒（微量法） 产品货号：BA1285 产品规格：100管/96样 产品简介： 在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维持肉制品的良好 外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱 发消化系统癌变。 在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物， 在540nm处有特征吸收峰。 技术指标： 最低检出限：0.0011164μmol/mL 线性范围：0.00125-0.2μmol/mL 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 产品组成： 试剂名称 规格 保存条件 提取液一 液体50mL×1瓶 室温 提取液二 液体50mL×1瓶 室温 提取液三 液体50mL×1瓶 室温 提取液四 粉剂×1瓶 室温 试剂一 液体10mL×1瓶 4℃ 试剂二 液体10mL×1瓶 4℃ 标准品 液体500μL×1支 4℃ 溶液的配制： 1、标准品：1μmol/mL亚硝酸钠标准溶液。将标准品用蒸馏水稀释成0.04µmol/mL备用。 需自备的仪器和用品： 天平、研钵/匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。 操作步骤： 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 称取样本约 0.5g，破碎，加入 0.5mL 提取液一，沸水浴 15min，冷却至室温，加入 0.5mL 提取液二，震荡摇 匀，加 0.5mL 提取液三，用镊子加少量提取液四（约 1mg），静置 30min，10000rpm/min 离心 15min，取上清液 待测。 二、测定步骤 1. 可见分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。 2. 操作表 空白管 测定管 标准管 样本（µL） 100 标准管（µL） 100 蒸馏水（µL） 100 试剂一（µL） 100 100 100 试剂二（µL） 100 100 100 混匀，室温静置 15min，取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中检测 A540 吸光值。 （空白管只需测定 1-2 次） 三、亚硝酸含量计算 1. 按样本质量计算： 亚硝酸含量（μmol/g 质量）=(A 样本-A 空白）÷[(A 标准-A 空白)÷C 标准] ×V 样本÷(W×V 样本÷V 总) =0.06×[(A 样本-A 空白）÷(A 标准-A 空白)]÷W 2. 按样本蛋白浓度计算： 亚硝酸含量（μmol/mg prot）=(A 样本-A 空白）÷[(A 标准-A 空白)÷C 标准] ×V 样本÷(Cpr×V 样本) =0.04×[(A 样本-A 空白）÷(A 标准-A 空白)]÷Cpr V 总：加入提取液体积，1.5mL；V 样本：反应中样本体积，0.1mL；C 标准：标准溶液浓度，0.04μmol/mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。 注意事项： 1. 试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。 2. 如果样本吸光值大于 1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。 实验实例： 1. 取 0.5g 咸菜破碎加入 0.5mL 提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，使用 96 孔 板测得计算 A 样本=0.078、A 空白=0.040、A 标准=0.413，按样本质量计算含量得： 亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.06×[(A 样本-A 空白）÷(A 标准-A 空白)]÷W=0.012μmol/g 质量。 2. 取 0.5g 火腿破碎加入 0.5mL 提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，使用 96 孔 板测得计算 A 样本=0.069、A 空白=0.040、A 标准=0.413，按样本质量计算含量得： 亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.06×[(A 样本-A 空白）÷(A 标准-A 空白)]÷W=0.009μmol/g 质量。