PS Focurose HPL
- HQ220325
- 武汉汇研
- 湖北省武汉市
- 现货
- 20L
- 5L
- 1L
- 500ml
- 100ml
- 25ml
- 5
- 1
- 360000 元
- 2022-09-15 14:54:01
武汉汇研生物科技有限公司
产品概述
为确保产品的性能和无忧的操作，使用前请仔细阅读本手册，有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或当地的销售人员（联系方式见附录）。
1.产品介绍
PS Focurose HPL是一种特定的亲和填料，适用于部分病毒、病毒样颗粒以及某些特定的抗原和蛋白（见表2）的分离纯化。
特点：
a.快速、简单（一步纯化）。
b.载量高。
c.易于放大。
表1：性能参数
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介质 |
PS Focurose HPL |
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基质 |
高刚性琼脂糖 |
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粒径范围 |
45-165µm |
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平均粒径 |
90±5µm |
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溶菌酶载量 |
≥3mg/ml介质 |
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pH稳定性 |
5-12（长期） 5-12（短期） |
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操作压力 |
≤0.3MPa |
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流速 |
≧300cm/h |
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贮存溶液 |
20%乙醇 |
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贮存温度 |
4-30℃ |
表2：PS Focurose HPL适用性
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Viruses |
Viral/Microbial Agents |
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Rabies Influenza Japanese Enchephalitis Feline Leukemia Feline Herpes Feline Calicivirus Respiratory Syncytial Virus Human Herpes Simplex Human Measles Human Parainfluenza |
Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits Hepatitis B Surface Antigen Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin |
2.溶液配制
平衡液：0.01M PB，调节pH 7.2，4-8℃保存。
洗脱液：0.01M PB、1.0M NaCl，调节pH 7.2，室温保存。
备注：平衡液pH为7.2±0.2，在平衡液中可经添加0.1M NaCl抑制少量杂质的吸附,取决样品特性；洗脱时可以把NaCl可增加到2M来提高洗脱能力。
3.样品的制备
a.样品所在溶液盐的组分及pH必须和平衡液保持一致，可以通过用平衡液稀释或透析、超滤、G25进行缓冲液置换处理。
b.样品过滤（粒径≤45µm用0.22µm过滤、粒径≤165µm用0.45µm过滤、粒径≤300µm用0.8µm过滤，避免堵塞离子交换介质）。
备注：不建议直接用强酸或强碱调整样品溶液的pH，可能会出现目标物的降解和失活。
4.纯化流程（以XK16/10为例）
4.1用纯化水以5ml/min冲洗5CV。
4.2用平衡液以5ml/min冲洗10CV。
4.3将样品以2.5ml/min上样，上样完成后用平衡液进行清洗直至基线平稳。
4.4用洗脱液以5ml/min洗脱10CV，并收集洗脱液。
4.5用纯化水以5ml/min冲洗5CV。
4.6用保存液以5ml/min冲洗后保存。
5.清洗（以XK16/10为例）
清洗后可以去除一些强结合性物质（例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等），从而达到恢复介质的优良性能（例如载量、流动性、柱效等）。
建议每使用5-10次后进行一次清洗，具体清洗频率需根据纯化的初始样品的洁净度进行调整。
5.1用3M NaCl以1ml/min的流速冲洗10CV。
5.2用0.1M NaOH以1ml/min的流速冲洗20CV。
5.3用3M NaCl以1ml/min的流速冲洗10CV。
5.4用纯化水以5ml/min的流速冲洗10CV。
5.5用保存液以5ml/min的流速冲洗5CV。
6.常见问题
表3：常见问题及解决方案
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问题 |
可能原因 |
解决方案 |
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纯化时目标物不与介质结合 或结合量较低 |
1.上样量过载 |
降低上样量 |
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2.上样流速过快 |
降低上样流速 |
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3.蛋白或脂类在介质中聚集 |
及时有效地清洗介质或更换新的介质 |
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4.目标物不带电或与介质带同样的电荷 |
筛选合适的结合缓冲液 |
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5.样本或平衡液中盐浓度和pH不正确 |
检查样品和平衡液中的电导和pH |
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6.选用了错误的缓冲液 |
参考缓冲液选择表 |
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7.样品中加入了不合适的去污剂 |
检查样品中是否有不合适的去污剂 |
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洗脱时没有收集到目标物 或只收集到少量目标物 |
1.目标物没有与介质结合或结合量较少 |
先确认目标物是否与介质结合 |
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2.洗脱条件不合适 |
洗脱液洗脱能力不够，加大盐浓度和调整洗脱液pH |
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3.洗脱时间不够 |
降低流速，延长洗脱液的保留时间 |
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4.洗脱体积过小 |
加大洗脱体积 |
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5.目标物在洗脱液条件下出现聚集沉淀 |
检测目标物在洗脱液条件（盐浓度和pH）下的溶解度和稳定性。 |
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目标物纯度较低
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1.样品没有经过前处理 |
样品上柱前必须要经过离心或过滤 |
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2.样品粘度过高 |
用平衡液适当的稀释样品，降低粘度。 |
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3.洗杂不彻底 |
加大洗杂体积直至基线平稳并与平衡液一致 |
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4.杂质蛋白或脂类在介质中聚集沉淀 |
及时有效地清洗介质 |
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5.洗脱条件不佳 |
优化洗脱条件 |
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6.目标物出现降解 |
检测目标物的稳定性 |
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7.柱料装填效果不佳 |
重新装填或购买 |
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8.分离柱顶部有较大储样体积 |
重新装柱或降低储样体积 |
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9.介质中有微生物生长 |
介质使用完后，请及时正确保存介质 |
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介质载量下降 |
1.上样流速过快 |
降低上样流速 |
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2.蛋白或脂类在介质中聚集，导致载量下降。 |
及时清洗介质 |
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3.使用次数过多，配基被氧化或脱落 |
及时清洗介质或更换新介质 |
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色谱峰上升过陡 |
介质装填过紧 |
重新装柱 |
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色谱峰上升过缓或拖尾 |
介质装填太松 |
重新装柱 |
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柱床有裂缝或干涸 |
出现泄露或大体积气泡引入 |
检查管路是否有泄露或气泡，重新装柱 |
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液流较慢 |
1.蛋白或脂类聚集 |
及时清洗介质或滤膜 |
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2.蛋白沉淀在介质中 |
调整平衡液和洗脱液组分，以维持目标物的稳定性和介质的结合效率 |
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3.分离柱中微生物生长 |
所用试剂必须经过过滤和脱气； 样品上柱前必须离心或过滤 |
7.订购信息
表4：订购信息表
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产品 |
规格 |
货号 |
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PS Focurose HPL |
25ml |
HQ220325025M |
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PS Focurose HPL |
100ml |
HQ220325100M |
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PS Focurose HPL |
500ml |
HQ220325500M |
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PS Focurose HPL |
1L |
HQ220325001L |
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PS Focurose HPL |
5L |
HQ220325005L |
|
PS Focurose HPL |
20L |
HQ220325020L |
备注：大规格包装产品或其它产品购买，请咨询本公司当地销售或售前技术支持。
