寡核苷酸池(Oligo Pools)定制
- Oligo Pools
- sbs赛百盛
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- 2022-08-15 18:58:58
北京赛百盛基因技术有限公司
寡核苷酸池(Oligo Pools)定制
l 每一个池里最多有12,472或92,918 oligos,即一次可提供多达12,472或92,918条引物。
l 高保真度,错误率仅为0.5%,即200 bases中只有1个错误碱基。
l 每条引物有1 fmole的全长DNA片段。
l 可合成长达170 bases的引物。
l 可用于合成生物学、基因合成、靶向测序及复合DNA文库等。
12,472条以内引物池(Oligo Pools)的报价
碱基长度(base) | 价格(人民币元) |
10-79 | 14,000 |
80-109 | 16,000 |
110-130 | 18,000 |
131-150 | 19,000 |
151-170 | 21,000 |
*2-3周交货
92,918条以内引物池(Oligo Pools)的报价
碱基长度(base) | 价格(人民币元) |
10-79 | 35,000 |
80-109 | 40,000 |
110-130 | 44,000 |
131-150 | 48,000 |
151-170 | 53,000 |
*2-3周交货
寡核苷酸池(Oligo pools)应用指南
对于寡核苷酸池(Oligo pools)引物设计和扩增我们可以提供一些通用的使用指南,对于具体的实验,我们的指南只能作为通用指导原则使用,您需要根据实验条件调整具体的实验步骤。Oligo pools的使用指导原则主要包括以下几点:
● 将所有序列加上一套通用引物,并在使用前进行PCR扩增。PCR扩增可以达到纯化Oligo pools的效果,因为失败的引物序列(指5’端缺失的引物序列)不能进行扩增。
●为了达到较高的退火温度我们建议使用高Tm值或较长的引物。一般而言,较高的退火温度可减少引物错配,增强扩增的特异性。
●PCR扩增时我们建议不要用常规的Taq酶,推荐使用热启动酶,常用的有Fusion,Q5,Pfu,Vent和Platinum Taq酶。对于酶的选择需要谨慎,有些酶在使用前需要检测。
●由于不同用户的序列长度、引物设计和聚合酶体系不同,因此起始模板的使用量也不同。作为PCR模板,建议使用反应总体积的1/100、1/400、1/1600、1/6400和1/25600进行梯度试验。设定PCR循环数比如25个循环进行扩增,使用凝胶或者Bioanalyzer检测PCR产物的量。只要PCR产物量达到要求,则使用体积较少的模板量作为最终的模板使用量。
●如果需要从产物中提取多组序列,则先使用巢式PCR扩增全部的序列然后使用内引物扩增各组序列。仅一轮PCR可能不会得到较好的结果。
●去除引物的基本策略由Oligo pools下游应用的具体需要而定,例如平末端和粘性末端。
●对于通常的克隆来说,用户可以在通用引物内部插入IIS型限制性内切酶能够识别的酶切位点,PCR扩增后再去除通用引物。这些限制性内切酶可以在识别位点附近进行酶切,保持可变序列的完整性。限制性酶切后,寡核苷酸序列即可插入载体。