D-乳酸(D-Lac)测定试剂盒(比色法)
- BPC037
- bpro
- 上海市
- 一周内
- 50T
- 450 元
- 2022-08-15 14:42:06
上海朗顿生物科技有限公司
1.原理
以NAD+为氢受体,LDH催化乳酸脱氢产生丙酮酸,是NAD+转化成NADH。其中NBT的递氢是NBT还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
2.测定意义
乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。
3.测试所需仪器设备及自备试剂
可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器,精密移液器,试管,双蒸水。
4.适用范围
本试剂盒适合测定血清、血浆、组织等样本中D-乳酸(D-Lac)的含量
5.试剂及配置
试剂 |
50T |
100T |
试剂1 |
5ml*1瓶,用时定容到50ml |
10ml*1瓶,用时定容到100ml |
试剂2 |
显色剂*1支(-20℃保存),用时用10ml双蒸水稀释,现配现用 |
显色剂*1支(-20℃保存),用时用20ml双蒸水稀释,现配现用 |
试剂3 |
5ml*1瓶 |
10ml*1瓶 |
试剂4 |
酶冻干粉*1支,-20℃保存 |
酶冻干粉*1支,-20℃保存 |
试剂5 |
10ml*1瓶,用时稀释10倍 |
20ml*1瓶,用时稀释10倍 |
标准品(3mmol/L) |
100μl*1支 |
100μl*1支 |
6.样本处理
(1)血清、血浆:建议直接加样。
(2)组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清进行测定。
(3)细胞培养上清:建议直接加样。
7. 操作步骤
(1)混合试剂:
a. 50T:50ml试剂2应用液+10ml显色剂应用液+5ml试剂3+ 1支酶冻干粉,临用前混合
b. 100T:100ml试剂2应用液+20ml显色剂应用液+10ml试剂3+ 2支酶冻干粉,临用前混合
(2)反应
空白管 |
标准管 |
测定管 |
|
混合试剂(ml) |
1 |
1 |
1 |
37℃预温5分钟
双蒸水 |
0.02 |
||
标准品 |
0.02 |
||
待测样本 |
0.02 |
37℃孵育10分钟
试剂6 |
2 |
2 |
2 |
混匀,1cm光径,双蒸水调零,530nm测定各管波长