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重组蛋白酶K
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  • 2022-08-08 19:33:56

北京赛百盛基因技术有限公司

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重组蛋白酶K

 

 

 

目录号 规格 价格
PTK-100 100mg 100元


 
产品简介
   蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种之一,来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)的蛋白酶K基因。本产品是由重组酵母表达的基因重组蛋白质,在酶分子结构设计上,参考国内外文献,做了六个定点突变,理论上可以提高酶活性50倍。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。在pH 4到pH 12的条件下均有活性,在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,用于生物样品中蛋白质的降解。此酶经脱色和色谱纯化去除了RNA和DNA,也检测不到其它杂酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可以用于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质。譬如DNA疫苗和肝素的制备等。
 
货号:        PTK-100
规格:        每个独立包装中含有100毫克的蛋白酶K(或者客户包装)
比活性值:    40.5 U/mg蛋白,含有50%冻干保护剂。
来源种属:    林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber
分子质量:    29,730
 
贮存和使用
干粉状态可在0~4ºC条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积,-20ºC贮存。运输可在室温下进行。
正确的贮存条件下,干粉状态的有效期可达一年。液体状态在-20ºC有效期为半年。打开包装使用后,如果在2~8ºC环境下放置超过一周时间,建议过滤除菌或增加稳定剂,防止微生物污染。
 
贮存和稀释缓冲液:50 mM Tris-HCL缓冲液,2mM CaCL2 (pH 8.0)。
质量控制

活性单位定义 37ºC、pH 7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1 µmol酪氨酸的蛋白酶K 的量,定义为一个单位(U)。
脱氧核糖核酸酶残留 以λ DNA为底物,37ºC消化6小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。
核糖核酸酶残留 25ºC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。

 
 
酶活测定和稳定性试验
 
(1) 酶活测定 Sigma-Aldrich 方法:
 
 
 
(2)纯度和消化蛋白测试(SDS-PAGE)
 
结果:  蛋白质纯度超过 99% (激光扫描 SDS-PAGE胶)
 
(3)  稳定性测试:(一年数据)
 
结论:冻干粉正确储存一年内活性不变;液体酶酶活半年内降低小于5%。
 

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